[发明专利]一种检测疯草内生真菌中苦马豆素含量的方法

摘要

本发明为一种测定疯草内生真菌中苦马豆素含量的方法，该方法是将内生真菌菌丝样品经预处理，制备成供试溶液；用高效液相色谱仪蒸发光散射检测器检测，以体积比为0.2~2：0.2~2的乙腈：乙酸铵缓冲液的混合液为流动相，经HILIC柱，将待检样品中的苦马豆素与其他物质分离；以不同浓度苦马豆素的对数与对应的响应峰面积的对数作图，得到苦马豆素的标准曲线。该方法有效地分离内生真菌Undifilum oxytropis中的苦马豆素，直接应用于苦马豆素的定量分析。该方法分离效果好、专属性强、准确性高，分析方法可靠。

主权项

一种检测疯草内生真菌中苦马豆素含量的方法，其特征在于，包括下列步骤：1）将内生真菌菌丝样品经预处理，制备成供试溶液；所述菌丝样品预处理是首先采用甲醇提取菌丝样品，提取液挥干后用乙酸溶解，经阳离子树脂交换柱动态循环交换1 h；用去离子水冲洗树脂中的杂质；再用稀氨水洗脱树脂柱，收集氨水洗脱液，浓缩挥干；最后甲醇溶解，离心后取上清液，挥干待用；2）用高效液相色谱仪蒸发光散射检测器检测，以体积比为0.2~2：0.2~2的乙腈：乙酸铵缓冲液的混合液为流动相，经HILIC柱，将待检样品中的苦马豆素与其他物质分离；所述的高效液相色谱仪蒸发光散射检测器的参数设置为增益值：150；载气流速：25 psi；漂移管温度：55℃；雾化器温度：36℃；所述的乙酸铵缓冲液浓度为5 mmol/L；所述的流动相中还添加占流动相总体积0.02%的氨水；3) 以不同浓度苦马豆素的对数与对应的响应峰面积的对数作图，得到苦马豆素的标准曲线。