[发明专利]基于氧化石墨烯的靶向性基因载体材料及制备和应用

摘要

本发明涉及一种具有肿瘤靶向性的基因载体材料及其制备方法和应用。它是以功能化氧化石墨烯作为siRNA等基因分子的靶向输送载体，首先将肿瘤细胞靶向分子叶酸与氨基封端的聚乙二醇通过酰胺键连接；再将氧化石墨烯与上述偶联物通过酰胺键连接，得到具有肿瘤靶向性的功能化氧化石墨烯；然后将氨基化的具有芳香共轭结构的分子通过π-π共轭锚定到氧化石墨烯表面；最后利用带正电性的功能化氧化石墨烯与具有带负电性的基因分子通过静电作用相互吸附在一起，制备出具有肿瘤靶向性的高效基因输送体系。该载体材料对叶酸受体表达较高的肿瘤细胞具有较好的靶向性，负载siRNA后能降低相应的靶基因水平及相关蛋白表达。本发明为基因的体内靶向输送提供了新方法。

主权项

一种基于功能化氧化石墨烯的肿瘤靶向性基因载体材料，其特征在于它是以叶酸和聚乙二醇偶联物修饰的功能化氧化石墨烯接枝氨基化的具有芳香共轭体系的分子盐酸氨甲基化芘、盐酸氨基化卟啉或盐酸阿霉素后作为载体，负载基因分子siRNA或DNA制成，其中，叶酸、聚乙二醇、氧化石墨烯与氨基化的具有芳香共轭体系的分子的质量比：1∶2 100∶2 20∶0.01 100；制备方法是：将叶酸和氨基封端的聚乙二醇混溶于N，N 二甲基亚砜和水的混合溶剂搅拌反应，旋蒸，浓缩物过葡聚糖凝胶柱，产物叶酸和聚乙二醇偶联物浓缩冻干后在脱水剂的存在下与氧化石墨烯超声搅拌反应，分离，洗涤产物，再与氨基化的具有芳香共轭体系的分子搅拌反应，最后调节pH值为1～3，分离，洗涤产物，得到带正电荷的功能化氧化石墨烯，分散在水或培养基RPMI1640中与基因分子混合，孵育即可；所述的基因分子的负载量为0.5～50wt％。