[发明专利]制备经纤维蛋白遗传修饰的腺病毒的载体及其构建方法无效
申请号: | 201110009853.8 | 申请日: | 2011-01-18 |
公开(公告)号: | CN102174575A | 公开(公告)日: | 2011-09-07 |
发明(设计)人: | 夏海滨;王东阳 | 申请(专利权)人: | 陕西师范大学 |
主分类号: | C12N15/861 | 分类号: | C12N15/861;C12N15/66 |
代理公司: | 西安永生专利代理有限责任公司 61201 | 代理人: | 申忠才 |
地址: | 710062 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 一种制备经纤维蛋白遗传修饰的腺病毒的载体,在E1区携带报告基因表达元件插入Ad5腺病毒基因组352bp与3326bp之间,Ad5腺病毒载体基因组中原有的BamHI已经突变,由原G突变为C、BamHI位点GGATCC变为序列为CGATCC;在Ad5腺病毒基因组纤维蛋白的HI loop引入两个单一的酶切位点,C末端引入两个单一的酶切位点,Ad5载体的两个单一酶切位点间插入用于筛选的表达元件。其构建方法包括在E1区携带CMV-eGFP-SV40 pA表达框的腺病毒质粒载体的构建、BamHI位点突变的腺病毒质粒载体的构建、用于腺病毒纤维蛋白遗传修饰穿梭载体的制备、用于制备经纤维蛋白遗传修饰的腺病毒的载体的制备步骤。 | ||
搜索关键词: | 制备 纤维蛋白 遗传 修饰 病毒 载体 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种制备经纤维蛋白遗传修饰的腺病毒的载体,其特征在于:在E1区携带报告基因表达元件,将该表达元件插入Ad5腺病毒基因组352bp与3326bp之间,Ad5腺病毒载体基因组中原有的BamHI已经突变,突变位点位于Ad5腺病毒基因组序列的第21562碱基,由原来的G突变为C,原来的BamHI位点GGATCC变为序列为CGATCC;在Ad5腺病毒基因组纤维蛋白的HI loop即第32679bp处引入两个单一的酶切位点,在Ad5腺病毒纤维蛋白的C末端引入两个单一的酶切位点,在Ad5载体的两个单一酶切位点之间插入一个用于筛选的表达元件。
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