[发明专利]一种分离纯化烟草中两种致香前体物的方法

摘要

本发明属于分离纯化技术领域，涉及烟草中有效成分的分离纯化技术，具体涉及一种从新鲜烟叶中提取、分离和纯化α-4,8,13-西柏三烯-1,3-二醇和β-4,8,13-西柏三烯-1,3-二醇的方法。本发明分离纯化方法，包括如下步骤：（1）浸取；（2）液-液萃取；（3）正相硅胶柱色谱分离；（4）正相氰基柱色谱分离；（5）反相C18柱色谱分离，获得两种致香前体物。本发明分离纯化方法获得的两种致香前体物的纯度均大于99%，可以作为标准品应用于相关科学研究中；整个分离纯化产品回收率高，工艺操作简便，自动化程度高，易实现大批量制备。

主权项

一种分离纯化烟草中α‑4，8，13‑西柏三烯‑1，3‑二醇和β‑4，8，13‑西柏三烯‑1，3‑二醇的方法，包括如下步骤：(1)浸取：采用浸洗法萃取新鲜烟叶的表面分泌物，萃取液浓缩至干，得到深褐色浸膏S1；(2)液‑液萃取：采用液‑液萃取法得到含西柏烷类化合物的提取液S2；(3)正相硅胶柱色谱分离：采用正相硅胶柱对获得的提取液S2进行梯度洗脱，得到主要物质为α‑4，8，13‑西柏三烯‑1，3‑二醇和β‑4，8，13‑西柏三烯‑1，3‑二醇的洗脱液S3，所述流动相选用逐渐增加极性的梯度洗脱剂；(4)正相氰基柱色谱分离：采用正相氰基制备柱对获得的洗脱液S3进行梯度洗脱，得到主要物质为α‑4，8，13‑西柏三烯‑1，3‑二醇和β‑4，8，13‑西柏三烯‑1，3‑二醇的洗脱液S4，所述流动相选用逐渐增加极性的梯度洗脱剂；(5)反相C18柱色谱分离：采用反相C18制备柱对获得的洗脱液S4进行梯度洗脱，洗脱时在210nm处先后出现两个强吸收峰，分别收集两个强吸收峰对应的洗脱液S5和洗脱液S6，将洗脱液S5和洗脱液S6分别减压浓缩干燥后得到α‑4，8，13‑西柏三烯‑1，3‑二醇和β‑4，8，13‑西柏三烯‑1，3‑二醇。