[发明专利]一种从蝇蛆中提取甲壳素和抗菌肽的方法

摘要

本发明属于产物提取技术领域，涉及一种从蝇蛆中提取甲壳素和抗菌肽的方法，先将鲜蝇蛆经过消毒和漂洗干净后挤压使蝇蛆皮与内脏团浆液分离；先用盐酸溶液浸泡，洗涤后烘干，再用NaOH溶液浸泡除去蛋白；保留残液，洗涤后烘干，经粉碎后加NaOH的溶液，水浴98℃加热反应；壳聚糖放入乙酸溶液中溶解后停止反应，过滤、洗涤，50℃烘干得壳聚糖，再在蝇蛆内脏团浆液中加入乙酸，均浆，4℃过夜，过滤，滤液用海藻酸吸附，过滤，再用盐酸溶液洗脱吸附在海藻酸上的抗菌肽，将洗脱液调pH值为3.5后，用NaCl沉析，透析，脱盐，干燥得抗菌肽粗制品；其技术路线合理，成本低，产率高，经济价值大，环境友好，可有效利用蝇蛆资源制得天然产物品种。

主权项

一种从蝇蛆中提取甲壳素和抗菌肽的方法，其特征在于先将鲜蝇蛆经过消毒和漂洗干净后，用压辊挤压，使蝇蛆皮与内脏团浆液分离，蝇蛆皮作为提取甲壳素的原料，内脏团浆液作为提取抗菌肽的原料；具体工艺包括壳低聚糖纯化、昆虫抗菌肽提取和蛋白粉纯化三个模块；壳低聚糖纯化：对收取的蝇蛆进行筛选，除去杂质后，先用重量百分比浓度为1％的盐酸溶液浸泡蝇蛆皮数小时，洗涤干净后烘干，再用重量百分比浓度为4％NaOH溶液浸泡1‑20小时除去蛋白，保留残液，洗涤干净后烘干，经粉碎后加重量百分比浓度为40％NaOH的溶液，水浴98℃加热，保持反应8小时；再重复提纯一次，取少量壳聚糖放入重量百分比浓度为1％的乙酸溶液中溶解后停止反应，过滤、洗涤，50℃烘干得壳聚糖，取壳聚糖溶于重量百分比浓度为5％的乙酸溶液，调pH值5.5‑6，加入甲壳素酶和纤维素酶，50℃酶解反应24h，变成浑黄色均相非粘性溶液，过滤，使滤液中的壳低聚糖平均聚合度为10，用乙醇沉淀，过滤，干燥得壳低聚糖；昆虫抗菌肽提取：在蝇蛆内脏团浆液中加入乙酸至0.5mol/L的浓度，均浆，4℃过夜，过滤，滤液为抗菌肽酸性提取物，用海藻酸吸附，过滤，再用0.2mol/L盐酸溶液洗脱吸附在海藻酸上的抗菌肽，将洗脱液用NaOH调PH值为3.5后，用NaCl沉析，透析，脱盐，干燥得抗菌肽粗制品；粗蛋白粉纯化：把重量百分比浓度为4％NaOH脱蛋白残液与抗菌肽酸性提取物用海藻酸吸附后的残液合并，调节PH值为7，50℃真空浓缩，乙醇沉淀，过滤，干燥，制得粗蛋白粉；将剩余的残酸、碱混合，调PH值为7，排放。