[发明专利]以鱼肠为原料制备小口径人工血管的方法

摘要

本发明在国内外首次将一种全新的价廉物美的材料即鱼肠来源的细胞外基质应用于小口径人工血管的研制中。鱼肠来源丰富，价廉物美，所制备的小口径人工血管成本低廉。由于鱼肠来源的细胞外基质在形态上与小口径血管相同，因此操作简便易行。本发明所制备的小口径人工血管在人体血压下，不破裂，不漏血，不会导致凝血反应，有利于血管内皮细胞的粘附。能同时满足小口径血管和长度上的要求。

主权项

一种以鱼肠为原料制备小口径人工血管的方法，其特征在于，依次通过下列步骤实现：(1)鱼肠的准备：取新鲜鱼肠，剔除筋膜和脂肪，去除鱼肠内容物，洗净；(2)鱼肠的去细胞处理：将步骤(1)所得的鱼肠依次进行脱脂，漂洗，酶处理，漂洗，去垢剂处理，漂洗，冷冻干燥；脱脂：将鱼肠浸泡在肥皂水中，每隔1小时搅动10分钟，如此反复操作12次；漂洗：捞出鱼肠，包裹于纱布中，置于水龙头下，流水冲洗8小时；胰蛋白酶处理：将鱼肠浸泡于浓度为2.5g/L的胰蛋白酶溶液中，8小时；复合酶处理：将鱼肠浸泡于含30U/ml DNA酶和0.025mg/ml RNA酶的溶液中，4小时；漂洗：捞出鱼肠，包裹于纱布中，置于水龙头下，流水冲洗2小时；去垢剂处理：将鱼肠浸泡于浓度为20g/L的TrisHcl和v/v浓度为1％Triton X-100的溶液中，12小时；漂洗：捞出鱼肠，包裹于纱布中，置于水龙头下，流水冲洗12小时，磷酸盐缓冲溶液漂洗3次，每次12小时；冷冻干燥：将鱼肠套在圆柱体模具上，冷冻干燥，得鱼肠来源的细胞外基质；(3)小口径人工血管的制备：将步骤(2)所得鱼肠来源的细胞外基质置于浓度为10～50g/L的PLGA三氯甲烷溶液中浸泡1小时，取出后自然风干，磷酸盐缓冲溶液漂洗3次，每次1小时，冷冻干燥，密封保存。