[发明专利]一种应用Rv3872新型融合蛋白制备的牛结核抗体鉴别检测试纸条无效
| 申请号： | 201010194736.9 | 申请日： | 2010-06-01 |
| 公开（公告）号： | CN101900727A | 公开（公告）日： | 2010-12-01 |
| 发明（设计）人： | 郭爱珍;于清龙;刘冬光;涂玲玲;陈颖钰;廖娟红;凌洁玉;陈焕春 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | G01N33/558 | 分类号： | G01N33/558;G01N33/544;G01N33/532;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;C07K19/00;C12R1/19 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 王敏锋 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明属于动物传染病基因工程技术领域。公开了一种利用RV3872、ESAT6和CFP10三基因融合蛋白制备的检测牛结核抗体的免疫胶体金试纸条及制备方法与应用。以融合蛋白作为胶体金标记抗原和硝酸纤维素膜上检测区的捕获抗原建立胶体金免疫层析试纸条。本发明试剂条对牛结核抗体的检测具有特异性强和灵敏度高的突出优点，能同时鉴别检测卡介苗免疫和非结核分枝杆菌感染。本发明包括一种重组大肠杆菌(Escherichia coli)BL21/pET28a-MPBrce，该菌株表达牛分枝杆菌RCE蛋白，其保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M208244。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 应用 rv3872 新型 融合 蛋白 制备 结核 抗体 鉴别 检测 试纸 | ||
【主权项】：
1.一种牛结核抗体的检测试纸条，其包括样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背衬，其特征在于，在PVC背衬(7)上按顺序依次粘附有样品垫(1)、结合垫(2)、硝酸纤维素膜(3)、吸水垫(4)；所述的结合垫(2)上包被有保藏号为CCTCCNO：M208244的重组大肠杆菌所表达的Rv3872-CFP10-ESAT6蛋白与胶体金的标记物；所述的硝酸纤维素膜(3)上分别包被有Rv3872-CFP10-ESAT6蛋白的检测线(5)、抗Rv3872-CFP10-ESAT6蛋白IgG构成的质控线(6)；其中，Rv3872-CFP10-ESAT6蛋白是以牛分支杆菌全基因组为模板克隆Rv3872、CFP10和ESAT6基因，构建三种基因融合表达的原核表达载体，并在大肠杆菌中表达得到。
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