[发明专利]一种肌氨肽苷注射液及注射用肌氨肽苷的制备方法

摘要

肌氨肽苷注射液及注射用肌氨肽苷由健康家兔肌肉和心肌提取的含多肽、氨基酸、核苷、及核苷酸等混合物的灭菌水溶液及适量辅料冻干制成的冻干剂。用于脑卒中，脑供血不足所致脑功能减退和周围神经疾病的辅助治疗。本发明属于医药技术领域。介绍了一种制造方法，其过程为清洗、切块、匀浆、深冻、加热煮沸、分离上清、酸碱沉淀、碱沉、热压、深冻、超滤、检测、调节多肽与次黄嘌呤的比例、超滤。除菌过滤、灌装，灭菌制得肌氨肽苷注射液，加适量的辅料除菌过滤、灌装、冷冻干燥，制得注射用肌氨肽苷。整个过程简便完整，保证产品符合国家标准，并且保证了病毒灭活，同时注射液灭菌F₀大于8，无菌保证水平高。

主权项

1、一种肌氨肽苷注射液及注射用肌氨肽苷的制备方法，其过程是a、化冻、清洗切块：取符合质量标准的兔心肌和肌肉，于投料前数小时从冷库中取出，用冷水浸泡化透后，洗净血水，称重。兔心和兔肌肉以适当比例混合，或分别处理，切成适宜的小块，以纯化水冲洗三次。b、匀浆：将上述兔心和兔肌肉按组织重量加入1～1.5倍纯化水或注射用水，再用纯化水或注射用水冲洗胶体磨后绞碎，制成匀浆。c、深冻：上述匀浆液于-10℃～-30℃深冻24小时以上，取出，室温化冻。d、加热煮沸分离上清：将兔心肌和兔肌肉组织液加热煮沸，持续加热10-30分钟，分离上清，将组织挤压净提取液。e、酸碱沉淀：上清液用NaOH调pH至9.0-11.0，加热至沸持续10-30分钟，冷却，分离上清。上清液再用盐酸调pH2.0-4.0，加热至沸，持续10-30分钟，分离上清。亦可先酸沉后碱沉。上清液调pH至7.0-7.5即可。f、碱沉：上述溶液再调pH9.0-11.0，加热至沸，10-30分钟，冷却，分离上清。g、超滤：上清液调pH7.0-7.5，分级超滤，先过分子量一万道尔顿的中空纤维超滤器然后再过分子量3000道尔顿超滤柱一次。h、热压、深冻、超滤：上述超滤液于121℃热压15-25分钟，放至室温，于-10℃～-20℃深冻过夜，取出自然化冻，过一万分子量超滤器一次。i、检测、调节多肽与次黄嘌呤的比例：检测上述提取液多肽和次黄嘌呤浓度，若二者比例为1.75∶0.25，上下浮动在标准允许范围内即可。若次黄嘌呤比例较低，则用分子量300-1000的纳滤器纳滤至透过液为原溶液的1/2-2/3。分别测定透过液和截留液的多肽与次黄嘌呤的浓度，确定二者混合的比例，使混合后多肽与次黄嘌呤的比例为1.75∶0.25，(二者上下浮动范围在标准允许范围内)，且多肽浓度大于1.75mg/ml，若小于1.75mg/ml，可加热至沸浓缩至多肽浓度大于1.75mg/ml。j、超滤：上述溶液调pH7.0-7.5，过一万分子量超滤器，即得肌氨肽苷溶液。于-10℃～-30℃深冻。k、制剂：将肌氨肽苷溶液于投料前取出，化透，调pH7.2±0.2，加水稀释至所需浓度，过0.22微孔滤膜，灌封，于100℃30-40分钟、115℃30-40分钟或121℃12-30分钟热压灭菌，即得肌氨肽苷注射液。将肌氨肽苷溶液化透后，加入适量甘露醇做为辅料(一般为溶液量的10％-15％)，过0.22μm微孔滤膜，灌装，冷冻干燥，即得注射用肌氨肽苷。其特征是：a、制造过程简便，适用性强，无有机溶剂加入。b、反复的酸碱热沉，保证了制剂可见异物合格。c、采用了纳滤技术，调节多肽与次黄嘌呤的比例，避免外加次黄嘌呤。d、本工艺采用121℃12-30分钟热压，保证了病毒灭活条件，也对制剂的可见异物合格有利。e、注射剂采用121℃12-30分钟灭菌，保证了F0值大于8，无菌保障水平高。