[发明专利]二次高速逆流色谱分离射干中异黄酮类单体化合物的方法

摘要

本发明涉及医药技术领域，具体涉及从射干中分离纯化单体化合物鸢尾苷、野鸢尾苷、鸢尾苷元、野鸢尾黄素和次野鸢尾黄素素的方法。国内外多采用柱色谱法和重结晶等分离纯化射干中的有效单体，这些方法存在成本高且操作繁琐、样品损失严重等问题。本发明采用二次高速逆流色谱来分离射干中单体化合物，特别是采用两套不同溶剂体系高速逆流色谱技术将目标化合物鸢尾苷、野鸢尾苷、鸢尾苷元、野鸢尾黄素和次野鸢尾黄素与其他极性相近的干扰成分分离，从而获得高纯度的目标化合物。本发明操作简便、分离效率高、产品纯度好，可连续进样，适于工业化生产。

主权项

1、一种从射干中分离纯化单体化合物鸢尾苷、野鸢尾苷、鸢尾苷元、野鸢尾黄素和次野鸢尾黄素素的方法，其特征在于该方法包括如下步骤：A、第一次高速逆流色谱分离纯化：构成高速逆流色谱固定相、流动相的溶剂体系为正己烷∶正丁醇∶甲醇∶水＝1∶4∶1.5～2∶6或乙酸乙酯∶正丁醇∶水＝2∶1∶3，在分液漏斗中充分振摇后静止分层，上相为固定相，下相为流动相；先使逆流色谱仪柱子中充满固定相，然后使主机转动，再泵入流动相，取射干粗提物溶于少量上相和下相，由进样阀进样，根据检测器谱图接收流分“I”、“II”；对高速逆流固定相液进行回收，挥干有机溶剂，得第一次高速逆流固定相挥干物；B、第二次高速逆流色谱分离纯化：构成高速逆流色谱固定相、流动相的溶剂体系为氯仿∶甲醇∶水为4∶2.7～3∶2，对第一次高速逆流固定相挥干物进行第二次分离，分离方法同步骤A；根据检测器谱图接收流分“III”、“IV”和“V”；流分“I”为野鸢尾苷，流分“II”为鸢尾苷，流分“III”为次野鸢尾黄素，流分“IV”为野鸢尾黄素，流分“V”为鸢尾苷元。