[发明专利]一种远志毛状根系培养生产远志酸的方法

摘要

本发明涉及一种远志毛状根系培养生产远志酸的方法，以远志下胚轴和叶片为外植体，用活化了的毛状根农杆菌进行转化，使毛状根农杆菌Ri质粒的T－DNA整合到远志细胞核DNA中，表达形成毛状根，经过多次继代培养获得远志毛状根系。所获得远志毛状根与中药远志主要成分相同的远志酸(即远志皂苷)，并且含量不低于野生中药远志。可作为一种新药源提供远志产品，解决远志需求量逐年增加，野生资源匮乏以及栽培品的品质下降，给临床、中成药加工和出口带来的实际问题。

主权项

1.一种远志毛状根系培养生产远志酸的方法，其包括如下步骤：(1)取无菌远志种子，接种在幼苗培养基上进行幼苗培养，获得无菌幼苗；(2)取所述步骤(1)获得的无菌幼苗的下胚轴、叶片外植体，放入预培养基进行暗培养；(3)取所述步骤(2)中进行预培养的下胚轴、叶片等外植体，经发根农杆菌A4介导，进行转化；(4)将所述步骤(3)介导转化后的下胚轴、叶片等外植体在预培养基进行弱光共培养；(5)将所述步骤(4)进行共培养的下胚轴、叶片等外植体放入抑菌培养基进行抑菌继代培养，直至外植体外形成毛状根；(6)将所述步骤(5)中抑菌培养的具有毛状根的外植体放入毛状根扩增培养基中进行毛状根扩大培养；(7)将所述步骤(6)中获得的远志毛状根进行干燥，测定其所远志皂苷等酸含量。