[发明专利]一种天然AFLP接头制备的方法无效
| 申请号： | 200710020069.0 | 申请日： | 2007-02-09 |
| 公开（公告）号： | CN101037685A | 公开（公告）日： | 2007-09-19 |
| 发明（设计）人： | 田大成;江海洋;唐萍 | 申请（专利权）人： | 南京大学 |
| 主分类号： | C12N15/09 | 分类号： | C12N15/09;C12N15/11;C12N15/66 |
| 代理公司： | 南京天翼专利代理有限责任公司 | 代理人： | 汤志武;王鹏翔 |
| 地址： | 210093*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 天然AFLP接头的方法制备，选择质粒作为载体，利用两个互补的DNA作为引物，且这两个引物序列中有AFLP需要的酶切位点EcoR I/Mse I、Apa I/Taq I酶切位点或其他的酶切位点，通过PCR方法，扩增出具有酶切位点EcoR I和Mse I、Apa I和Taq I的接头核心区域序列，把核心区域序列连入pGEM－T载体，同时在核心区域序列的两翼加上不同的基因DNA片段各构建成一个接头单元序列，然后把不同的接头单元序列通过pBluescript KS载体串联起来，构建为含有多拷贝接头DNA的载体，再导入大肠杆菌内天然扩增接头，最后利用EcoR I和Mse I、Apa I和TaqI酶切出接头序列，得到AFLP接头DNA。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 天然 aflp 接头 制备 方法 | ||
【主权项】：
1、天然AFLP接头的制备方法，其特征是首先选择质粒作为载体，利用两个互补的DNA作为引物，且这两个引物序列中有AFLP需要的酶切位点EcoR I/Mse I、Apa I/Taq I酶切位点或其他的酶切位点，通过PCR方法，扩增出具有酶切位点EcoRI和Mse I、Apa I和Taq I的接头核心区域序列，把核心区域序列连入pGEM-T载体，同时在核心区域序列的两翼加上不同的基因DNA片段各构建成一个接头单元序列，然后把不同的接头单元序列通过pBluescript KS载体串联起来，构建为含有多拷贝接头DNA的载体，再导入大肠杆菌内天然扩增接头，最后利用EcoR I和Mse I、Apa I和Taq I酶切出接头序列，得到两个等摩尔量的AFLP接头DNA。
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