[发明专利]重组白喉毒素及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了重组白喉毒素及其制备方法和应用，白喉毒素DAB₃₈₉与α－促黑素细胞激素两者之间添加了以(Gly₄Ser)₂组成的连接肽，为了重组毒素纯化的方便，添加上前缀体，扩增出前缀体+DAB₃₈₉(Gly₄Ser)₂－αMSH基因片段，构建pET28a/前缀体+DAB₃₈₉(Gly₄Ser)₂－αMSH表达质粒，转化到大肠杆菌中表达，经IPTG诱导，获得含有前缀体+DAB₃₈₉(Gly₄Ser)₂－αMSH的表达蛋白，再经过纯化、Xa因子酶切、分离获得DAB₃₈₉(Gly₄Ser)₂－αMSH的融合蛋白，本发明通过实验证明：重组白喉毒毒素具有纯化方便，减少成本，收率高，提高重组毒素活性的优点；同时对恶性黑色素瘤具有特异性攻击和杀伤的特性，而对正常细胞无伤害，达到有效治疗恶性黑色素瘤疾病的目的。

主权项

1、重组白喉毒素，它包括：白喉毒素DAB389、连接肽(Gly4Ser)2、促黑素细胞激素αMSH。