[发明专利]精制海马追风膏中马钱子碱和士的宁的含量测定方法

摘要

本发明提供了一种用高效液相－紫外检测器法测定精制海马追风膏中主要活性成分士的宁和马钱子碱含量的测定方法，它的具体工艺步骤分a.供试品溶液的制备；b.对照品溶液的制备；c.测定方法。本发明与现有的薄层法比较，具有如下特点：灵敏度高，测量误差小；分离度好；稳定性和重现性好，受环境和操作影响小；用量少；操作简单；士的宁和马钱子碱均是有剧毒，用薄层色谱法仅能测定精制海马追风膏中士的宁的含量，而高效液相－紫外检测器法能同时测定精制海马追风膏中士的宁和马钱子碱两种物质的含量，就更加保证了药物的安全性和有效性。

主权项

1、精制海马追风膏中马钱子碱和士的宁的含量测定方法，其特征在于用高效液相-紫外检测器法测定精制海马追风膏中马钱子碱和士的宁的含量，其工艺步骤按如下进行：a.供试品溶液的制备：取精制海马追风膏100-500cm2，除去盖衬，剪碎，加稀硫酸50-150ml，超声处理20-50分钟，滤过，滤器及胶膏用稀硫酸洗涤2-4次，每次10-20ml，滤过，合并滤液，用40％氢氧化钠溶液调节pH值至9-10，用氯仿振摇提取3-5次，每次15-25ml，合并氯仿液，蒸干，放冷，残渣加甲醇溶解并转移至50ml量瓶中，精密吸取1ml，置于10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，作为供试品溶液；b.对照品溶液的制备：取马钱子碱对照品和士的宁对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含10-90μg的溶液，作为对照品溶液；c.测定方法：以十八烷基硅烷键合硅胶柱为色谱柱，以甲醇-乙腈-水为流动相，并加入离子对试剂，其中甲醇的比例为0～70％，乙腈的比例为0～50％，水的比例为20～90％；水相pH为2～5，pH调节剂为磷酸、醋酸、磷酸盐、三乙胺中的一种或几种的组合物，离子对试剂为十二烷基硫酸钠、庚烷磺酸钠，检测波长为250-260nm。