[发明专利]一种用于快速鉴定蛋白质及其N端序列的新方法和试剂盒无效
| 申请号： | 200610072597.6 | 申请日： | 2006-04-13 |
| 公开（公告）号： | CN101055267A | 公开（公告）日： | 2007-10-17 |
| 发明（设计）人： | 钱小红;周春喜;刘新;张养军 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/06;G01N1/28 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100850*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种用于快速测定蛋白质N端序列的新方法和试剂盒。该方法涉及蛋白质氨基的修饰、还原烷基化和胰酶酶切、酶切肽段的质谱分析、N端肽段的质谱识别与测序。通过对N端氨基的选择性同系物标记，在质谱上既容易确定N端肽段，又可以很方便地进行测序，主要用于确证蛋白质，尤其是基因工程产品的N端序列。本发明还描述了便于该方法实施的试剂盒。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 快速 鉴定 蛋白质 及其 序列 新方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
1.一种用于快速测定蛋白质N端序列的方法，该方法包括：(1)对蛋白质的氨基进行化学修饰(2)用还原剂打开蛋白质分子中的二硫键，破坏其高级结构；用烷基化试剂封闭巯基，防止其重新形成二硫键；(3)用化学消化或酶消化法对蛋白质进行消化，产生适于质谱分析的肽段；(4)用质谱分析技术分析蛋白质末端肽段，使其裂解产生碎片离子的质谱图；其特征在于所述步骤(1)的处理方法为：(a)用酸酐类或活化羧酸酯类同系物试剂对蛋白质的末端氨基进行化学修饰，使其带上同系物标记；(b)用一种或多种含游离氨基的化学试剂，对蛋白质的修饰反应进行终止。
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