[发明专利]采用标记链霉亲和素－生物素技术的蛋白质芯片

摘要

本发明涉及一种采用标记链霉亲和素-生物素技术的蛋白质芯片，将蛋白质点样并制作，杂交反应采取下列步骤：在点好样的芯片上滴加待测样品，用低浓度钠离子盐为主的洗脱液洗去多余样品，加封阻液封阻并再次洗净晾干，滴加以封阻液稀释过的生物素标记的蛋白质，洗净并于室温晾干，滴加以封阻液稀释过的荧光或酶标记链霉亲和素，洗净并于室温晾干。本发明的蛋白质芯片技术用于测定抗原、抗体，用于检测与蛋白质特异性结合的物质。本发明改进了制作方法，使得检测结果清晰、稳定，可靠性强。本发明利用不同的标记方法在不同性质的蛋白质上作标记，由此可测蛋白质的种类增多，扩大蛋白质芯片的应用范围。

主权项

1.一种采用标记链霉亲和素—生物素技术的蛋白质芯片，蛋白质的点样和制作技术采取下列步骤：(1)使用高速点样机器人将蛋白质样品抗原或者抗体点印于经戊二醛处理过的载玻片上或硝酸纤维素膜或尼龙膜上；(2)于室温过夜或者于37℃温育1小时固定于经戊二醛处理过的载玻片或硝酸纤维素膜或尼龙膜上；(3)在经戊二醛处理过的载玻片或硝酸纤维素膜或尼龙膜表面加上含牛血清白蛋白和吐温的封闭液，于37℃温育1小时；(4)用双蒸水充分洗涤并室温干燥；杂交反应采取下列步骤：(1)在点好样的芯片上滴加待测样品，于37℃温育1小时，使抗原抗体充分反应；(2)用含低浓度钠离子盐的洗脱液洗去多余样品，于室温晾干；(3)加含牛血清白蛋白和吐温的封闭液封阻并再次洗净晾干；其特征在于，杂交反应接着采取下列步骤：(4)滴加含牛血清白蛋白和吐温的封闭液稀释过的生物素标记的蛋白质，于37℃温育30分钟；(5)洗净并于室温晾干；(6)滴加含牛血清白蛋白和吐温的封闭液稀释过的荧光或酶标记链霉亲和素，于37℃避光温育30分钟；(7)洗净并于室温晾干；(8)若(6)中采用酶标记链霉亲和素，则滴加底物，避光温育30分钟，以终止液终止反应；反应结束后，利用芯片扫描分析仪对结果进行判读，检测结果。