一种分离的和/或人工pG1‑x启动子，其为由SEQ ID 1鉴别的巴斯德毕赤酵母的碳源调节型pG1启动子的功能变体，该pG1‑x启动子由长度为至少293bp的至少一部分SEQ ID 1组成或包含长度为至少293bp的至少一部分SEQ ID 1，其特征在于以下启动子区域：a)至少一个核心调节区，其包含核苷酸序列SEQ ID 2和SEQ ID 3；和b)非核心调节区，其为所述pG1‑x启动子序列内除了所述核心调节区以外的任何区域；其中所述pG1‑x启动子包含任何启动子区域中的至少一个突变和与SEQ ID 2及SEQ ID 3具有至少80％的序列一致性，和与除了SEQ ID 2及SEQ ID 3以外的任何区域具有至少50％的序列一致性；进一步的，其中所述pG1‑x启动子的特征在于相比于所述pG1启动子相同的或提高的启动子强度及诱导比率，其中启动子强度在诱导状态下，相比于所述pG1启动子提高至少1.1倍，和/或诱导比率相比于所述pG1启动子提高至少1.1倍。
本发明涉及一种包含启动子的分离的核酸序列，其是一种包含SEQ ID 1所示的pCS1的核酸序列或其有功能活性的变种的天然毕赤酵母序列，该变种是一种长度变种，一种突变体或SEQ ID 1的杂合序列，或其结合，涉及包含所述启动子的表达构建物和重组细胞，还涉及在所述启动子的控制下产生感兴趣的蛋白质的方法。本发明进一步涉及一种从真核细胞中识别组成型启动子的方法，和一种包含启动子的分离的核酸序列，该启动子在与编码POI的核苷酸序列可操作的连接时，指导其在宿主细胞中的表达水平高于在高和低生长速率的天然pGAP启动子控制下的表达水平。
