本发明提供了一种炭疽杆菌PA‑LF融合蛋白、ELISA试剂盒和应用,属于体外诊断技术领域。本发明提供了一种炭疽杆菌PA‑LF融合蛋白,氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明将LF结构域1与PA结构域2‑4融合,与全长LF结构域相比,不仅不会影响PA与抗体的结合,而且具有较高的安全性,另外,LF结构域1与PA融合还能识别并结合针对LF蛋白的特异性抗体,大大增加了检测的准确性的同时还降低了检测成本提高检测效率。此外,本发明还提供了以所述PA‑LF融合蛋白作为包被抗原制备ELISA试剂盒,用于炭疽杆菌抗体的检测中,为炭疽疫苗免疫动物后的抗体检测提供支持,为炭疽疫苗的免疫程序提供理论依据。