本发明公开了一种环形RNA高效表达载体,其具有如SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列,包括长度为92bp的上游骨架序列、长度为75bp的下游骨架序列和位于二者间用于插入待环化基因的酶切位点EcoRI,表达框架全长仅为173bp,本发明构建的环形RNA表达载体能够使外源插入序列高效地表达环形RNA,为环形RNA的获得提供了一种高效表达工具,在保证circRNA高效环化的前提下,对其成环所需的上下游侧翼序列的长度进行了高度优化,进一步降低侧翼序列带来的剪接副产物复杂度。
本发明公开了一种用于传染性支气管炎病毒中和抗体检测的ELISA试剂盒及其应用,属于生物技术领域。所述试剂盒包括:由S1蛋白中和抗原表位融合蛋白包被的酶联反应板,所述融合蛋白包括传染性支气管炎病毒编码的S1蛋白中的四个中和抗原表位,其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1‑4所示。本发明利用筛选鉴定的4个具有中和活性的抗原表位,将其进行串联融合表达出蛋白,作为检测抗原,建立一种简便、特异的中和抗体ELISA方法。该检测抗原对流行毒株具有通用性,能够在实际生产中快速检测鸡群血清样本中是否含有中和抗体,为准确判断鸡群免疫是否有效提供依据,为传染性支气管炎疫病的有效防控提供参考。