本发明公开了一种酶催化胞嘧啶生产胞苷的方法及应用，属于酶工程和生物催化领域。本发明通过采用重组表达技术对α‑D‑核糖基转移酶进行过量表达，获得过量的α‑D‑核糖基转移酶；将表达氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的α‑D‑核糖基转移酶的重组菌，或氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的α‑D‑核糖基转移酶，添加至含有胞嘧啶、α‑D‑核糖‑1‑磷酸盐的反应体系中，对底物胞嘧啶进行催化，可以高效生产胞苷，促进了其在医药等领域中的应用。这种高效α‑D‑核糖基转移酶可用于实现胞苷的工业化生产，利于降低其生产成本及环境污染，实现绿色生物制造。
本发明公开了一种酯酶pnbA‑BS突变体及其在制备l‑薄荷醇中的应用，所述酯酶pnbA‑BS突变体是以SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第400位丙氨酸突变为脯氨酸获得。以表达酯酶pnbA‑BS突变体A400P的基因工程菌为整细胞催化剂，催化dl‑乙酸薄荷酯的选择性拆分，恒速流加方式加入底物，底物加入量可达1700mM，产物l‑薄荷醇e.e.值99％，产物累积浓度可达600mM，反应时空得率可达160g/(L·d)。反应体系不添加有机溶剂，减少了化学品的使用，简化了产物分离工艺，是一种绿色、高效、简便的新型l‑薄荷醇制备方法。
本发明公开了一种老黄酶NemR‑PS突变体及其在制备(S)‑香茅醇中的应用，所述老黄酶NemR‑PS突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列中第275位、第351位氨基酸进行单突变或双突变获得的。通过构建共表达老黄酶NemR‑PS突变体、醇脱氢酶YsADH和葡萄糖脱氢酶BmGDHM6的基因工程菌，以该基因工程菌作为催化剂，以恒速流加方式加入底物，一锅法多酶级联催化底物(E/Z)‑柠檬醛的二步还原，产物(S)‑香茅醇累积浓度达500mM，产物e.e.值99％，反应时间仅需12h，没有中间产物和副产物残留。
