本发明公开了一种特异性封闭DNA聚合酶的核酸适配体及由此制备的热启动DNA聚合酶,属于生物技术、生物酶工程领域。所述核酸适配体是利用磁珠SELEX结合温度变化正反向筛选得到,序列如SEQ ID NO.1所示,能够在特定温度下热启动DNA聚合酶。本发明还公开了一种试剂盒,包括上述的适配体和DNA聚合酶以及专门的保存液,可用于恒温扩增核酸检测领域。
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种采用重组酶介导的等温扩增技术检测H7N9禽流感病毒的试剂盒及其应用。所述试剂盒包括反应缓冲溶液、RPA引物对、探针、RPA冻干粉末、醋酸镁溶液、无菌水和阳性对照;所述RPA引物对和探针用于扩增检测序列如SEQ ID NO.1所示的HA基因片段或序列如SEQ ID NO.2所示的NA基因片段。本发明提供了两个用于检测H7N9禽流感病毒的遗传标记物,建立了RT‑RPA扩增检测方法,所述检测方法的最低检出量为200copies/反应,特异性和灵敏度均优于传统RT‑PCR;且整个扩增反应在20℃~50℃范围的恒温条件下进行,20分钟即可完成反应。
本发明公开了一种鉴定新型冠状病毒的引物组、试剂盒及其应用。引物组包括如第1引物对至第168引物对中的至少一对,每个引物对均包括正向引物和反向引物,第1引物对的正向引物、第1引物对的反向引物至第168引物对的正向引物和第168引物对的反向引物依次如序列表中SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:336所示的引物。本发明提供的引物组对新型冠状病毒基因组上的168个MNP标记位点具有较高的扩增特异性和稳定性;使用该引物组的试剂盒对新型冠状病毒的鉴定具有良好的灵敏度、重现率和准确率,可用于非诊断目的的新型冠状病毒的定性鉴定、定量鉴定、遗传变异鉴定、指纹数据库构建和新型冠状病毒的精细分型鉴定与溯源。