本发明公开了一种多杀菌素聚酮合酶酰基转移酶突变体及其应用,涉及生物工程领域,包括第一突变体、第二突变体或第三突变体;其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示。公开了该突变体的编码基因、重组载体和重组菌以及其在生产纯度高的、组分单一的多杀菌素A的应用。公开了多杀菌素聚酮合酶模块八的酰基转移酶结构域SpnAT8蛋白的可溶性表达方法,包括培养菌体、洗脱目标蛋白以及用快速蛋白质液相色谱进一步纯化。本发明提供一种四点突变体与野生型相比,识别丙二酰‑CoA的活性恢复至19.5%,几乎丧失识别甲基丙二酰‑CoA的活性。
本发明公开了一种泰乐菌素聚酮合酶酰基转移酶突变体及其应用,涉及生物工程领域,包括第一突变体、第二突变体或第三突变体;其氨基酸序列分别如SEQ IDNO.2、SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示。公开了该突变体的编码基因、重组载体和重组菌以及其在催化丙二酰‑CoA水解中的应用。公开了泰乐菌素聚酮合酶酰基转移酶结构域TylAT5蛋白的可溶性表达方法,包括培养菌体、洗脱目标蛋白以及用快速蛋白质液相色谱进一步纯化。本发明提供一种高效表达酰基转移酶突变体的重组大肠杆菌催化丙二酰辅酶A的效率相比于野生型增加2.6倍。