本发明公开了一种亮氨酸脱氢酶组合突变体及其在生产L‑叔亮氨酸中的应用,属于酶工程和基因工程技术领域。本发明的亮氨酸脱氢酶突变体通过将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的亮氨酸脱氢酶的第123位谷氨酸、第125位缬氨酸及第143位苏氨酸分别突变为缬氨酸、蛋氨酸及半胱氨酸得到,突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的亮氨酸脱氢酶突变体催化活性提高,相对于野生型,突变体酶的酶活提高了206%。在600mM浓度的三甲基丙酮酸的条件下,反应14h后转化率可达到98%以上。
本发明公开了一种亮氨酸脱氢酶突变体及其在生产L‑2‑氨基丁酸中的应用,属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的亮氨酸脱氢酶突变体通过将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的亮氨酸脱氢酶的第125位缬氨酸突变为蛋氨酸得到,突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示,核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明的亮氨酸脱氢酶突变体催化活性提高,相对于野生型,突变体酶的酶活提高了55%。在300mM浓度的2‑羰基丁酸钠的条件下,反应6h后转化率可达到94%以上。
本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体及其在生产L‑2‑氨基丁酸中的应用,属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的ω‑转氨酶突变体通过将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的ω‑转氨酶的第153位缬氨酸突变为丙氨酸得到,突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示,核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明的ω‑转氨酶突变体催化活性提高,相对于野生型,突变体酶的酶活提高了578%。在300mM浓度的2‑羰基丁酸钠的条件下,反应12h后转化率可达到76%以上。