本发明涉及生物医药领域,提供了一种抗血清素抗体及其应用。本发明所提供的抗体W025选自下列至少之一:(1)具有SEQ ID NO:3、4和ATS所示的轻链CDR序列,以及具有SEQ ID NO:5、6和7所示的重链CDR序列;或者与(1)相比,具有至少80%序列同一性的氨基酸序列。此外,本发明还公开了利用此抗体制备的酶免试剂盒,具有较高的灵敏度和特异性。
本发明公开了一种基因免疫制备人神经元特异性烯醇化酶单克隆抗体的方法,步骤为:以SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2为引物,通过RT-PCR,得到NSE基因SEQ ID NO.3;将NSE基因接入pGEM-T,形成质粒pGEM-T-NSE;转染入BEL7402细胞中,培养,从细胞裂解液中纯化出NSE重组蛋白;用质粒注射小鼠;取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合得杂交瘤细胞;培养;筛选能产生针对NSE蛋白表位单抗的阳性杂交瘤细胞;将阳性杂交瘤细胞株注射于小鼠腹腔内使产生腹水;纯化得到人神经元特异性烯醇化酶单克隆抗体。本发明缩短了杂交瘤细胞前期筛选时间,使生产简单,操作容易,周期更短。