本发明提出了一种源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001的新型β-甘露聚糖酶基因完整mRNA和DNA序列的克隆方法,其核苷酸序列分别为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2。生物信息学分析表明该β-甘露聚糖酶属于糖苷水解酶第5家族,命名为Aus Man5A,其氨基酸序列为SEQ ID NO:3,相应的基因命名为Aus man5A。本发明还公开了β-甘露聚糖酶工程菌的构建以及重组β-甘露聚糖酶的高效表达和纯化的方法,制备的重组β-甘露聚糖酶的最适作用温度和pH分别为75℃和3.5,在pH 3.0-7.0、70℃以下稳定,具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
本发明提出了一种源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001菌株的新型β-1,4-内切葡聚糖酶基因完整mRNA和DNA序列的克隆和分析方法,其核苷酸序列分别为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2。生物信息学分析表明该β-1,4-内切葡聚糖酶属于糖苷水解酶第5家族,所以命名为Aus Cel5A,其氨基酸序列为SEQ ID NO:3,相应的基因命名为Aus cel5A。这为该基因的异源表达和工业化生产奠定了理论基础,有较大的工业化生产和应用潜力及经济价值,也为其它β-1,4-内切葡聚糖酶的研究奠定了理论基础。
本发明提出了一种源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001的β-1,4-内切葡聚糖酶基因完整mRNA和DNA序列的克隆方法,其核苷酸序列分别为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2。生物信息学分析表明该β-内切葡聚糖酶属于糖苷水解酶第12家族,命名为Aus Cel12A,其氨基酸序列为SEQ ID NO:3,相应的基因命名为Aus cel12A。本发明还公开了Aus Cel12A工程菌的构建以及重组Aus Cel12A的高效表达和纯化的方法。制备的重组Aus Cel12A的最适作用温度和pH分别为60℃和5.0,在pH 4.0-7.0、60℃以下稳定,具有较大的工业化生产潜力和经济价值,也为其它β-内切葡聚糖酶的研究奠定了理论基础。