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[发明专利]一种化合物在制备NGLY1抑制剂中的应用及NGLY1抑制剂筛选方法-CN202310161689.5在审
发明人：孙桂芹;刘瑞杰;陈妍雯;张绍兴;张瑜芯 -专利权人：浙江中医药大学
申请日： 2023-02-24 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： A61K31/704 文献下载
摘要：本发明涉及生物医药领域，尤其涉及一种化合物在制备NGLY1抑制剂中的应用及NGLY1抑制剂筛选方法。本发明首次发现当化合物中含有由通过糖苷键或‑CH2‑O‑键相连的鼠李糖基和葡萄糖基构成的二糖单元时，能够用于制备NGLY1抑制剂，这能为抗肿瘤和抗病毒药物的研发奠定基础。此外，本发明的NGLY1抑制剂筛选方法中，基于模拟分子对接的预测结果具有较高的准确性，能够减小后续实验验证的盲目性和工作量。
一种化合物制备 ngly1 抑制剂中的应用筛选方法

[发明专利]一种NGLY1调控细胞模型的构建方法-CN202310083004.X在审
发明人：孙桂芹;陈妍雯 -专利权人：浙江中医药大学
申请日： 2023-02-08 - 公布日： 2023-06-30 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明涉及基因表达调控技术领域，公开了一种NGLY1调控细胞模型的构建方法。本发明提供的shRNA的干扰靶点序列为如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；载体质粒中包含编码所述shRNA的核苷酸序列；慢病毒中包含编码所述shRNA的核苷酸序列，或者包含所述载体质粒。本发明中的shRNA、载体质粒和慢病毒能够应用于慢病毒介导的RNA干扰技术中，有效下调NGLY1基因的表达，构建NGLY1下调细胞模型，因而能够为NGLY1蛋白的生理病理功能研究提供方法，为NGLY1‑CDDG的致病机制研究奠定基础，并为NGLY1激活剂或抑制剂药物筛选、NGLY1‑CDDG的药物筛选提供技术支持。
一种 ngly1 调控细胞模型构建方法

[发明专利]一种包含人NGLY1基因的重组质粒、工程菌以及人工NGLY1的制备方法和检测方法-CN202210399618.4在审
发明人：孙桂芹;陈力;袁舒颖;陈妍雯 -专利权人：浙江中医药大学
申请日： 2022-04-15 - 公布日： 2023-06-06 - 主分类号： C12N15/56 文献下载
摘要：本发明涉及人NGLY1基因和人工NGLY1技术领域，尤其涉及一种包含人NGLY1基因的重组质粒、工程菌以及人工NGLY1的制备方法和检测方法，一种检测人工基因突变体NGLY1活性的检测方法，包括以标准N‑糖蛋白RNase B为底物，以人工正常NGLY1为对照，具体步骤如下：步骤1）底物变性：将RNase B置于恒温金属浴中，80‑100℃，5‑10 min使RNase B变性；步骤2）酶切反应：1~2μg热变性后的RNase B冷却至室温后，分别加入1~2μg纯化后的人工基因突变体NGLY1和对照组的人工正常NGLY11‑2μg/μL，定容20~30μL，在35~37℃下水浴反应8‑12 h；步骤3）取反应产物用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳法SDS‑PAGE及质谱MALDI‑TOF·MS鉴定。
一种包含 ngly1 基因重组质粒工程以及人工制备方法检测