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[发明专利]不同抗性水稻品种上褐飞虱体内类酵母共生菌的检测方法-CN201310358301.7无效
发明人：俞晓平;马正;曹伟;侯云;边亚琳;郝培应;许益鹏;申屠旭萍 -专利权人：中国计量学院
申请日： 2013-08-17 - 公布日： 2014-02-05 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种不同抗性水稻品种上褐飞虱体内类酵母共生菌的检测方法。选取不同抗性水稻上的褐飞虱，以体内的类酵母共生菌为研究对象，结合变性梯度凝胶电泳(DGGE)与荧光定量PCR(qPCR)技术进行定量检测。三种抗性水稻品种分别为：ASD7(bph2)、RH(Bph3)、Mudgo(Bph1)。检测的类酵母共生菌为Noda菌(Hypomyceschrysospermus)、季也蒙毕赤酵母(Pichiaguilliermondii)、假丝酵母(Candidaquercitrusa)。本发明利用DGGE和qPCR技术检测了褐飞虱体内三种类酵母共生菌在不同抗性水稻品种上的变化规律，为明确褐飞虱在适应抗性品种过程中其体内共生菌的变化规律提供了新的技术手段，对探明飞虱防治的新途径起到了至关重要的作用。
不同抗性水稻品种上褐飞虱体内酵母共生检测方法

[实用新型]吸虫器-CN201320285778.2有效
发明人：郝培应;俞晓平;申屠旭萍;马艳;边亚琳 -专利权人：中国计量学院
申请日： 2013-05-23 - 公布日： 2014-01-01 - 主分类号： A01M3/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种吸虫器，包括主体（10），所述主体（10）包括手柄（9），主体（10）上设置有开关（7）和电源线插孔（8），主体（10）的内部中间处设置有风机（6），所述主体（10）的内部前侧设有回风管（1）、衔接套（3）、集虫管（4）和密封罩（5），所述衔接套（3）衔接回风管（1）和集虫管（4），还包括引导管（2），所述引导管（2）的一端斜插入回风管（1）并经衔接套（3）延伸至集虫管口，另一端从主体内部伸出主体（10）的进气口。本实用新型的吸虫器对采样部位的目标昆虫实现瞬间采集，逃逸率低；样本存活率高，几乎为100%，且活力高。
吸虫

[发明专利]一种褐飞虱不同龄期体内类酵母共生菌检测方法-CN201310358330.3无效
发明人：马正;俞晓平;曹伟;侯云;边亚琳;郝培应;许益鹏;申屠旭萍;王正亮 -专利权人：中国计量学院
申请日： 2013-08-17 - 公布日： 2013-12-25 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种褐飞虱不同龄期体内类酵母共生菌检测方法。选取不同龄期的褐飞虱，针对多种类酵母共生菌，结合变性梯度凝胶电泳与荧光定量PCR技术进行定量检测。龄期为1及2龄、3龄、4龄、5龄、刚羽化成虫。酵母共生菌为Noda菌（Hypomyceschrysospermus）、季也蒙毕赤酵母(Pichiaguilliermondii)、假丝酵母(Candidaquercitrusa)。本发明利用DGGE和qPCR技术检测了褐飞虱不同龄期多种类酵母共生菌的变化规律，为今后研究类酵母共生菌与褐飞虱生长发育之间的联系提供了有效的工具。
一种褐飞虱不同龄体内酵母共生检测方法

[发明专利]淀粉酶产色链霉菌电击转化方法-CN201310170684.5有效
发明人：马正;俞晓平;陶立彬;申屠旭萍;边亚琳;郝培应;许益鹏 -专利权人：中国计量学院
申请日： 2013-05-08 - 公布日： 2013-10-02 - 主分类号： C12N15/76 文献下载
摘要：本发明公开了一种S.diastatochromogenes电击转化方法。细胞经过温和破壁处理后，进行电击转化。温和破壁处理为使用含有5μgml-1溶菌酶的电击缓冲液；或使用含有1%甘氨酸的电击缓冲液；或使用30μgml-1penicillinG的电击缓冲液；或使用含有3μgml-1溶菌酶和20μgml-1penicillinG的电击缓冲液。电击转化的参数为电场强度为12kV/cm，细胞浓度 1×109个/ml，质粒DNA浓度为2μg。电击转化后利用YEME培养基进行孵育。利用YEME培养基进行孵育的时间为2-3小时。本发明为S.diastatochromogenes的高效转化提供了一种方便可靠的方法，为S.diastatochromogenes基因工程铺平了道路。
淀粉酶产色链霉菌电击转化方法

[发明专利]加强了toyB表达的重组淀粉酶产色链霉菌及构建方法与用途-CN201310170665.2有效
发明人：马正;俞晓平;陶立彬;申屠旭萍;边亚琳;郝培应;许益鹏 -专利权人：中国计量学院
申请日： 2013-05-08 - 公布日： 2013-09-11 - 主分类号： C12N15/60 文献下载
摘要：本发明公开了一种加强了toyB表达的重组淀粉酶产色链霉菌及构建方法与用途。它过量表达了生物合成丰加霉素的关键酶-6-丙酮酰基四氢蝶呤合成酶编码基因toyB，具有比淀粉酶产色链霉菌(Streptomycesdiastatochromogenes)1628更高的丰加霉素合成能力。构建过程如下：1）构建表达载体pIB139-toyB；2）利用接合转移法将所述的表达载体整合入淀粉酶产色链霉菌染色体，获得所述的工程菌。利用pIB139载体上的启动子permE*启动toyB基因的表达，利用接合转移法将载体pIB139-toyB特异性的整合入淀粉酶产色链霉菌(Streptomycesdiastatochromogenes)1628的染色体，获得了遗传稳定的工程菌。与原始菌株相比，重组菌6-丙酮酰基四氢蝶呤合成酶酶活提高至少1.3倍，丰加霉素产量至少提高23.4%。
加强 toyb 表达重组淀粉酶产色链霉菌构建方法用途

[发明专利]加强了frr表达的重组淀粉酶产色链霉菌及构建方法与用途-CN201310170674.1无效
发明人：马正;俞晓平;陶立彬;申屠旭萍;边亚琳;郝培应;许益鹏 -专利权人：中国计量学院
申请日： 2013-05-08 - 公布日： 2013-09-11 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种加强了frr表达的重组淀粉酶产色链霉菌及构建方法与用途。它过量表达了核糖体循环因子frr，具有比淀粉酶产色链霉菌(Streptomyces diastatochromogenes)1628更高的丰加霉素合成能力。构建过程如下：1）构建表达载体pIB139-frr；2）利用接合转移法将所述的表达载体整合入淀粉酶产色链霉菌染色体，获得所述的工程菌。利用pIB139载体上的启动子permE*启动frr基因的表达，利用接合转移法将载体pIB139-frr特异性的整合入淀粉酶产色链霉菌(Streptomyces diastatochromogenes)1628的染色体，获得了遗传稳定的工程菌。与原始菌株相比，重组菌丰加霉素合成途径关键酶基因toyF的转录水平显著增强，丰加霉素产量至少提高43.6%，发酵周期缩短12h。
加强 frr 表达重组淀粉酶产色链霉菌构建方法用途

[发明专利]淀粉酶产色链霉菌表达体系的建立方法-CN201310170711.9无效
发明人：马正;俞晓平;刘金秀;申屠旭萍;边亚琳;郝培应;许益鹏 -专利权人：中国计量学院
申请日： 2013-05-08 - 公布日： 2013-09-11 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种淀粉酶产色链霉菌表达体系的建立方法。首先利用绿色荧光蛋白基因gfp筛选淀粉酶产色链霉菌表达体系的必要或高效成分，然后构建目标基因的表达体系。必要或高效成分为红霉素抗性基因组成型启动子permE*。目标基因促进丰加霉素的生产。目标基因为血红蛋白基因vgb。构建的过程如下：1）构建载体pIB139-gfp；2）利用接合转移法将所述的表达载体整合入淀粉酶产色链霉菌染色体，获得重组菌。本发明提供了一种有效的淀粉酶产色链霉菌表达体系的筛选方法及应用。重组菌与原始菌株相比，重组菌丰加霉素产量至少提高了21.2%，菌浓提高了11.6%。
淀粉酶产色链霉菌表达体系建立方法

[发明专利]产丰加霉素的淀粉酶产色链霉菌工程菌、构建方法及用途-CN201310170658.2无效
发明人：马正;俞晓平;刘金秀;申屠旭萍;边亚琳;郝培应;许益鹏 -专利权人：中国计量学院
申请日： 2013-05-08 - 公布日： 2013-08-14 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种产丰加霉素的淀粉酶产色链霉菌工程菌、构建方法及用途。它的染色体上整合有来源于透明颤菌的血红蛋白基因vgb，具有比淀粉酶产色链霉菌(Streptomyces diastatochromogenes)1628更高的丰加霉素表达能力。构建过程如下：1）构建表达载体pIB139-vgb；2）利用接合转移法将所述的表达载体整合入淀粉酶产色链霉菌染色体，获得所述的工程菌。利用pIB139载体上的启动子permE*启动vgb基因的表达，利用接合转移法将载体pIB139-vgb特异性的整合入淀粉酶产色链霉菌(Streptomyces diastatochromogenes)1628的染色体，获得了遗传稳定的工程菌。与原始菌株相比，重组菌丰加霉素产量至少提高21.2%，菌浓提高了11.6%。
产丰加霉素淀粉酶产色链霉菌工程构建方法用途

[发明专利]加强了adpA表达的重组淀粉酶产色链霉菌及构建方法与用途-CN201310168066.7有效
发明人：马正;俞晓平;陶立彬;申屠旭萍;边亚琳;郝培应;许益鹏 -专利权人：中国计量学院
申请日： 2013-05-08 - 公布日： 2013-08-07 - 主分类号： C12N15/31 文献下载
摘要：本发明公开了一种加强了adpA表达的重组淀粉酶产色链霉菌及构建方法与用途。它过量表达了次级代谢网络中心转录调控因子adpA，具有比淀粉酶产色链霉菌(Streptomyces diastatochromogenes)1628更高的丰加霉素合成能力。构建过程如下：1）构建表达载体pIB139-adpA；2）利用接合转移法将所述的表达载体整合入淀粉酶产色链霉菌染色体，获得所述的工程菌。利用pIB139载体上的启动子permE*启动adpA基因的表达，利用接合转移法将载体pIB139-adpA特异性的整合入淀粉酶产色链霉菌(Streptomyces diastatochromogenes)1628的染色体，获得了遗传稳定的工程菌。与原始菌株相比，重组菌丰加霉素合成途径的关键酶基因toyF转录水平显著增强，丰加霉素产量至少提高31.6%。为进一步提高丰加霉素产量，早日实现工业化生产奠定了基础。
加强 adpa 表达重组淀粉酶产色链霉菌构建方法用途

[发明专利]链格孢菌代谢产物在防治番茄灰霉病菌中的应用-CN201110088203.7有效
发明人：申屠旭萍;俞晓平;董胜张;郝培应;边亚琳;马正 -专利权人：中国计量学院
申请日： 2011-04-08 - 公布日： 2011-10-19 - 主分类号： A01N63/04 文献下载
摘要：本发明涉及微生物技术领域，本发明所述的樟树内生真菌是从浙江杭州天目山采集的樟树植物活体中采用内生真菌分离技术分离获得的，经微生物分类学鉴定，命名为链格孢菌(Alternaria alternata)31，该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏日期2010年12月31日，保藏登记号CGMCC No.4508。本发明最显著的特征是该菌株液体发酵能够产生对植物真菌病害病原菌如黄瓜立枯病菌(Rhizoctonia solani)、西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporium)和番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)等有抑制作用的活性代谢产物，是农业上重要的微生物资源。
链格孢菌代谢产物防治番茄病菌中的应用

[发明专利]局限曲霉28代谢产物在防治黄瓜立枯病菌中的应用-CN201110088204.1有效
发明人：申屠旭萍;俞晓平;董胜张;郝培应;边亚琳;马正 -专利权人：中国计量学院
申请日： 2011-04-08 - 公布日： 2011-10-12 - 主分类号： A01N63/04 文献下载
摘要：本发明涉及微生物技术领域，本发明所述的大蒜内生真菌是从浙江杭州郊外菜园中采集的大蒜植物活体中采用内生真菌微生物分离技术分离获得的，经微生物分类学鉴定，命名为局限曲霉菌(Aspergillus restrictus)28，该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏日期2010年12月31日，保藏登记号CGMCC No.4507。本发明最显著的特征是该菌株液体发酵能够产生对植物真菌病害病原菌如黄瓜立枯病菌(Rhizoctonia solani)和水稻纹枯病菌(Thanatephorus cucumeris)等有抑制作用的活性代谢产物，是农业上重要的微生物资源。
局限曲霉 28 代谢产物防治黄瓜立枯病中的应用

[发明专利]稻黑孢菌46代谢产物在防治番茄灰霉病菌中的应用-CN201110088207.5有效
发明人：申屠旭萍;俞晓平;董胜张;郝培应;边亚琳;马正 -专利权人：中国计量学院
申请日： 2011-04-08 - 公布日： 2011-10-12 - 主分类号： A01N63/04 文献下载
摘要：本发明涉及微生物技术领域，本发明所述的夹竹桃内生真菌是从浙江省农业科学院内采集的夹竹桃活体中采用内生真菌分离技术分离获得的，经微生物分类学鉴定，命名为稻黑孢菌(Nigrospora oryzae)46，该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏日期2010年12月31日，保藏登记号CGMCC No.4509。本发明最显著的特征是该菌株液体发酵能产生对黄瓜立枯病菌(Rhizoctonia solani)、菜豆炭疽病菌(Colletotrichumlindemuthianum)和番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)等有抑制作用的活性代谢产物，是农业上重要的微生物资源。
稻黑孢菌 46 代谢产物防治番茄病菌中的应用

[发明专利]稻黑孢菌46代谢产物在防治黄瓜立枯病菌中的应用-CN201110088208.X有效
发明人：申屠旭萍;俞晓平;董胜张;郝培应;边亚琳;马正 -专利权人：中国计量学院
申请日： 2011-04-08 - 公布日： 2011-10-12 - 主分类号： A01N63/04 文献下载
摘要：本发明涉及微生物技术领域，本发明所述的夹竹桃内生真菌是从浙江省农业科学院内采集的夹竹桃活体中采用内生真菌分离技术分离获得的，经微生物分类学鉴定，命名为稻黑孢菌(Nigrospora oryzae)46，该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏日期2010年12月31日，保藏登记号CGMCC No.4509。本发明最显著的特征是该菌株液体发酵能产生对黄瓜立枯病菌(Rhizoctonia solani)、菜豆炭疽病菌(Colletotrichumlindemuthianum)和番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)等有抑制作用的活性代谢产物，是农业上重要的微生物资源。
稻黑孢菌 46 代谢产物防治黄瓜立枯病中的应用

[发明专利]链格孢菌代谢产物在防治黄瓜立枯病菌中的应用-CN201110088201.8有效
发明人：俞晓平;申屠旭萍;董胜张;郝培应;边亚琳;马正 -专利权人：中国计量学院
申请日： 2011-04-08 - 公布日： 2011-10-05 - 主分类号： A01N63/04 文献下载
摘要：本发明涉及微生物技术领域，本发明所述的樟树内生真菌是从浙江杭州天目山采集的樟树植物活体中采用内生真菌分离技术分离获得的，经微生物分类学鉴定，命名为链格孢菌(Alternaria alternata)31，该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏日期2010年12月31日，保藏登记号CGMCC No.4508。本发明最显著的特征是该菌株液体发酵能够产生对植物真菌病害病原菌如黄瓜立枯病菌(Rhizoctonia solani)、西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporium)和番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)等有抑制作用的活性代谢产物，是农业上重要的微生物资源。
链格孢菌代谢产物防治黄瓜立枯病中的应用

[发明专利]稻黑孢菌46代谢产物在防治菜豆炭疽病菌中的应用-CN201110088206.0有效
发明人：俞晓平;申屠旭萍;董胜张;郝培应;边亚琳;马正 -专利权人：中国计量学院
申请日： 2011-04-08 - 公布日： 2011-10-05 - 主分类号： A01N63/04 文献下载
摘要：本发明涉及微生物技术领域，本发明所述的夹竹桃内生真菌是从浙江省农业科学院内采集的夹竹桃活体中采用内生真菌分离技术分离获得的，经微生物分类学鉴定，命名为稻黑孢菌(Nigrospora oryzae)46，该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏日期2010年12月31日，保藏登记号CGMCC No.4509。本发明最显著的特征是该菌株液体发酵能产生对黄瓜立枯病菌(Rhizoctonia solani)、菜豆炭疽病菌(Colletotrichum lindemuthianum)和番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)等有抑制作用的活性代谢产物，是农业上重要的微生物资源。
稻黑孢菌 46 代谢产物防治菜豆炭疽病菌中的应用