本发明提供了一种激活γ珠蛋白表达的sgRNA及其CRISPR/Cas9复合体与应用,属于基因工程技术领域。所述sgRNA包括sgRNA1或sgRNA2,所述sgRNA1的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示;所述sgRNA2的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明通过CRISPR/Cas9基因编辑技术,在γ珠蛋白近端启动子区域115bpBCL11A结合位点和自然的HPFH缺失的13nt处构建sgRNA,从而激活γ珠蛋白,提升胎儿血红蛋白的含量,以达到减轻中重型β地中海贫血症状的目的。本发明通过选择得到的sgRNA,安全性能高,为成功用于β地中海贫血的临床治疗提供实验依据。