本发明涉及一种小麦Glu‑A1位点等位基因分型的特异性引物及检测方法。本发明根据1Axnull、1Ax1和1Ax2*等位基因的序列差异,设计了可以区分1Axnull、1Ax1和1Ax2*的特异性PCR引物,核苷酸序列如SEQ ID No.1~6所示,从而建立了可同时检测Glu‑A1位点3种主要等位基因1Axnull、1Ax1和1Ax2*的荧光标记特异性PCR毛细管电泳检测方法。该检测方法与传统的琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳法相比,具有准确率高、检测通量大、耗时短和数据采集自动化等优势,为小麦HMW‑GS优质亚基分子标记辅助选择提供了技术支撑,尤其适用于大规模样本筛选。
本发明公开了一种鉴别四种天南星科药用植物(天南星、半夏、虎掌、水半夏)的荧光PCR检测试剂盒及应用。鉴别四种天南星科药用植物的检测试剂盒,它包括天南星特异引物和特异探针,半夏属通用特异引物、半夏特异探针、虎掌特异探针,水半夏特异引物和特异探针,内标质控特异引物和特异探针,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑13所示。本发明以特异性荧光探针与模板配对,具有高度的特异性与专一性,并且扩增效率高,灵敏度高,准确率高,重现性好,检测周期短,能在1.5小时内完成检测,且能实时检测DNA扩增反应,具有很高的可行性与应用前景,可以为解决目前中药市场天南星科植物使用混乱的现象提供科学可靠的方法。
本发明公开了一种鉴别铁皮石斛的荧光PCR检测试剂盒及应用。该试剂盒包括铁皮石斛特异引物和特异探针,核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑3所示;石斛属通用引物和通用探针核苷酸序列如SEQ ID NO.4‑6所示。使用上述的荧光PCR检测试剂盒进行PCR扩增可以对铁皮石斛及石斛属植物加以鉴别。本发明以特异性荧光探针与模板配对,具有高度的特异性与专一性,并且扩增效率高,灵敏度高,准确率高,重现性好,检测周期短,能在1.5小时内完成检测,且能实时检测DNA扩增反应,具有很高的可行性与应用前景,为真正的铁皮石斛在中药市场的地位保驾护航。
本发明公开了一种用于鉴别五灵脂的引物组、试剂盒和检测方法,其引物组序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本发明以五灵脂的一对特异性引物对待测样本DNA提取物进行PCR扩增,为五灵脂的检测和鉴定提供准确的靶标位点,快速准确进行鉴定。本发明的检测方法简便,快捷,有效,能够从干燥的五灵脂粪便中快速准确的鉴定出五灵脂。