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[发明专利]一种外源萝卜片段特异标记及其制备方法和应用-CN202110220860.6有效
发明人：王同华;郭一鸣;涂金星;陈卫江;李莓;范连益;曲亮;惠荣奎 -专利权人：湖南省作物研究所
申请日： 2017-08-24 - 公布日： 2023-09-26 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明涉及一种甘蓝型油菜外源萝卜片段特异标记和外源萝卜片段特异标记的制备方法及应用，通过甘蓝型油菜萝卜细胞质不育恢复材料CLR650全基因组重测序数据和萝卜基因组草图信息比对，开发出外源萝卜片段的特异分子标记CLR9‑1～CLR9‑20。通过细胞质不育恢复材料CLR650回交群体的目标单株，获得BC4分离群体；将BC4群体中的可育株，采用混合法进行多世代混合选择，直至获得可育株所占比例超过75％的混合分离群体；最后通过多代自交进行纯合稳定，获得甘蓝型油菜萝卜细胞质不育恢复系。本发明克服了现有方法中恢复基因遗传力严重偏低、性状难以纯合稳定的障碍。
一种萝卜片段特异标记及其制备方法应用

[发明专利]一种外源萝卜片段特异标记及其制备方法和应用-CN202110220867.8有效
发明人：王同华;郭一鸣;涂金星;陈卫江;李莓;范连益;曲亮;惠荣奎 -专利权人：湖南省作物研究所
申请日： 2017-08-24 - 公布日： 2023-09-26 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明涉及一种甘蓝型油菜外源萝卜片段特异标记和外源萝卜片段特异标记的制备方法及应用，通过甘蓝型油菜萝卜细胞质不育恢复材料CLR650全基因组重测序数据和萝卜基因组草图信息比对，开发出外源萝卜片段的特异分子标记CLR9‑1～CLR9‑20。通过细胞质不育恢复材料CLR650回交群体的目标单株，获得BC4分离群体；将BC4群体中的可育株，采用混合法进行多世代混合选择，直至获得可育株所占比例超过75％的混合分离群体；最后通过多代自交进行纯合稳定，获得甘蓝型油菜萝卜细胞质不育恢复系。本发明克服了现有方法中恢复基因遗传力严重偏低、性状难以纯合稳定的障碍。
一种萝卜片段特异标记及其制备方法应用

[发明专利]一种甘蓝型油菜花期耐寒性的鉴定评价方法-CN202310678082.4在审
发明人：李莓;刘新红;郭一鸣;杨倩;李荣德;王同华;李宝;曲亮;严明理;范连益;徐理佳 -专利权人：湖南省作物研究所
申请日： 2023-06-08 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： A01G7/06 文献下载
摘要：本发明属于油菜种植技术领域，公开了一种甘蓝型油菜花期耐寒性的鉴定评价方法，包括如下步骤：首先在甘蓝型油菜处于花期时进行零下低温胁迫处理，处理结束后将植株移回温室恢复生长；然后植株恢复生长5d后，采集植株上部薹茎叶、花蕾、花瓣、主花序、分枝花序、果柄、幼角果、长角果的寒害表型症状，并根据相应表型症状进行评分；最后根据总评分判定该植株的低温耐性等级。本发明从甘蓝型油菜植株低温胁迫下的表型症状变化入手，直观地观察到甘蓝型油的表型性状，构建了甘蓝型油菜花期低温胁迫下评价体系；操作条件易于满足、易于操作、方便快捷，通过大田生产检验，结果准确可靠，可作为花期耐寒性油菜品种选育提供种质参考。
一种甘蓝油菜花期耐寒性鉴定评价方法

[发明专利]一种水溶蛋白鉴定甘蓝型油菜杂交种种子纯度方法-CN202110446363.8有效
发明人：惠荣奎;陈卫江;李莓;范连益;曲亮;王同华;郭一鸣;刘新红 -专利权人：湖南省作物研究所
申请日： 2021-04-25 - 公布日： 2023-05-23 - 主分类号： G01N27/447 文献下载
摘要：本发明适用于生物鉴定方法技术领域，提供了一种水溶蛋白鉴定甘蓝型油菜杂交种种子纯度方法。本发明采取水提取蛋白制备上样，通过凝胶制备、点样、电泳、卸板、染色、纯度计算的步骤，实现水溶蛋白鉴定甘蓝型油菜杂交种种子纯度方法。该方法既可以克服油菜纯度鉴定中检验周期长等缺陷，又比醇溶蛋白样品迁移的速度快，鉴定效率高，而且提取液经济环保，提取效率高，谱带清晰，分辨率高，为甘蓝型油菜杂交种种子纯度快速鉴定提供了新的途径。
一种蛋白鉴定甘蓝油菜杂交种种子纯度方法

[发明专利]一种适用于机械收获的甘蓝型油菜品种的筛选方法及其应用-CN202110948945.6有效
发明人：周兴;李莓;邓力超;曲亮;刘新红;郭一鸣;王同华;惠荣奎;范连益;徐理佳 -专利权人：湖南省作物研究所
申请日： 2021-08-18 - 公布日： 2022-05-03 - 主分类号： A01G22/15 文献下载
摘要：本发明提供了一种适用于机械收获的甘蓝型油菜品种的筛选方法及其应用，该筛选方法包括步骤S1、选择试验品种在第一试验田上进行至少两次重复种植试验；步骤S2、记录试验品种的终花期和成熟期，在终花期时标记代表性植株；步骤S3、在终花期15‑25天后，每天测定所述代表性植株的有效角果含水率直至低于20％；步骤S4、在步骤S3的基础上，摘取代表性植株不同生长部位的多个有效角果进行脱水前后的有效角果含水率差值测试，筛选出终花期15‑25天后每天的有效角果含水率差异率不超过10％的品种为适合机械收获的目标品种。该筛选方法所筛选出的目标品种在机械化种植方面的应用，大大降低了油菜机械收获损失。
一种适用于机械收获甘蓝油菜品种筛选方法及其应用

[发明专利]一种适用于阳台栽培的油菜品种的选育方法-CN202011506078.2有效
发明人：李莓;李宝;王同华;邓力超;郭一鸣;刘新红;曲亮;范连益 -专利权人：湖南省作物研究所
申请日： 2020-12-18 - 公布日： 2021-11-02 - 主分类号： A01H1/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种适用于阳台栽培的油菜品种的选育方法，将甘蓝型油菜品系167B作为母本，与“花羽衣甘蓝”杂交，以167B为父本与杂交后代进行多代回交，直至获得性状稳定、一致的特定性状的自交群体；将其种子暗培养，保留下胚轴短于3.0cm的幼胚，培养至成苗后，选择初花期植株高度小于70cm的单株进行多世代自交，直到获得纯合、稳定的矮杆自交系种子，即得到适用于阳台栽培的油菜品种。本发明利用远缘杂交将羽衣甘蓝苗期观赏性状导入甘蓝型油菜，实现了甘蓝型油菜目标性状的定向改良；同时利用幼胚定向筛选技术，实现紧缩株型的快速、准确筛选，不仅节省了人力、物力，而且提高了品种选择效率。
一种适用于阳台栽培油菜品种选育方法

[发明专利]一种外源萝卜片段特异标记及其制备方法和应用-CN201710735768.7有效
发明人：王同华;郭一鸣;涂金星;陈卫江;李莓;范连益;曲亮;惠荣奎 -专利权人：湖南省作物研究所
申请日： 2017-08-24 - 公布日： 2021-04-06 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明涉及一种甘蓝型油菜外源萝卜片段特异标记和外源萝卜片段特异标记的制备方法及应用，通过甘蓝型油菜萝卜细胞质不育恢复材料CLR650全基因组重测序数据和萝卜基因组草图信息比对，开发出外源萝卜片段的特异分子标记CLR9‑1～CLR9‑20。通过细胞质不育恢复材料CLR650回交群体的目标单株，获得BC4分离群体；将BC4群体中的可育株，采用混合法进行多世代混合选择，直至获得可育株所占比例超过75％的混合分离群体；最后通过多代自交进行纯合稳定，获得甘蓝型油菜萝卜细胞质不育恢复系。本发明克服了现有方法中恢复基因遗传力严重偏低、性状难以纯合稳定的障碍。
一种萝卜片段特异标记及其制备方法应用

[发明专利]用于油菜Pol-CMS杂交种或其亲本种子纯度鉴定的特异SSR标记引物及其应用-CN202011052970.8在审
发明人：王同华;李莓;郭一鸣;李宝;刘新红;曲亮;范连益 -专利权人：湖南省作物研究所
申请日： 2020-09-29 - 公布日： 2020-12-08 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于油菜Pol‑CMS杂交种或其亲本种子纯度鉴定的特异SSR标记引物，包括以下序列的正向引物F和反向引物R：正向引物F：5’‑AGTTAGCTCCTCTGTGGTTTGC‑3’；反向引物R：5’‑CTACAGCTCGATTAGGGATCGT‑3’。具有较强的通用性，在杂交种或其亲本种子纯度鉴定中更具实际意义。还公开了该特异SSR标记引物在判断油菜Pol‑CMS种子育性、油菜Pol‑CMS杂交种或其亲本种子纯度鉴定中的应用，操作简单，鉴定结果准确，具有较强的通用性，可大大简化新品种、新组合的纯度鉴定，为种子研究人员、种子管理和执法部门提供一个新的鉴定技术和方法。
用于油菜 pol cms 杂交种亲本种子纯度鉴定特异 ssr 标记引物及其应用

[发明专利]一种甘蓝型油菜萝卜细胞质不育恢复系的选育方法及在甘蓝型油菜育种上的应用-CN201710736472.7有效
发明人：王同华;陈卫江;李莓;涂金星;郭一鸣;范连益;曲亮;惠荣奎 -专利权人：湖南省作物研究所
申请日： 2017-08-24 - 公布日： 2020-03-24 - 主分类号： A01H1/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种甘蓝型油菜萝卜细胞质不育恢复系的选育方法，通过甘蓝型油菜萝卜细胞质不育恢复材料CLR650全基因组重测序数据和萝卜基因组草图信息比对，开发CLR650中恢复基因及其连锁外源萝卜片段的特异分子标记；然后通过特异分子标记辅助选育甘蓝型油菜萝卜细胞质不育恢复材料CLR650回交群体的目标单株，获得BC4分离群体；将BC4群体中的可育株，采用混合法进行多世代混合选择，直至获得可育株所占比例超过75％的混合分离群体；最后，通过多代自交进行纯合稳定，获得新的甘蓝型油菜萝卜细胞质不育恢复系。本发明克服了现有方法存在的恢复基因遗传力严重偏低、性状难以纯合稳定的障碍。
一种甘蓝油菜萝卜细胞质不育恢复选育方法育种应用

[发明专利]一种抗草甘膦油菜种子的鉴定方法-CN201911228243.X在审
发明人：王同华;李莓;张瑶婷;郭一鸣;刘新红;曲亮;范连益 -专利权人：湖南省作物研究所
申请日： 2019-12-04 - 公布日： 2020-02-21 - 主分类号： A01G31/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种抗草甘膦油菜种子的鉴定方法，涉及抗草甘膦油菜种子的领域，包括以下步骤：S1,将待检油菜种子置于抗草甘膦浓度为0.1～1.5（g/L）的溶液中浸泡8～10h；S2,将S1中的浸泡后的种子进行发芽暗培养48～60h；S3,暗培养的种子幼胚胚根有根毛，即判定所述油菜品种为抗草甘膦油菜，幼胚胚根无根毛，即为非抗草甘膦油菜。本发明的检测方法方便，操作简单，成本低且快速有效，能明显减少草甘膦转基因种子的抗性检测的工作量，在植物转基因研究中意义重大，在油菜抗草甘膦转基因油菜杂交种纯度鉴定中具有很好的应用前景，在大规模的抗草甘膦油菜的品种选育和杂交种纯度鉴定中具有实用价值。
一种抗草甘膦油菜种子鉴定方法

[发明专利]一种耐密植高产甘蓝型油菜杂交品种的选育方法及所获油菜杂交品种的应用-CN201610475242.5有效
发明人：李莓;陈卫江;范连益;曲亮;王同华;惠荣奎;邓力超 -专利权人：湖南省作物研究所
申请日： 2016-06-27 - 公布日： 2018-04-17 - 主分类号： A01H1/02 文献下载
摘要：一种耐密植高产甘蓝型油菜杂交品种的选育方法，包括以下步骤利用现有的n1个甘蓝型杂交油菜不育系和n2个甘蓝型油菜恢复系进行不完全双列杂交，得到F1代杂交种；将F1代杂交种进行田间随机区组多次重复品种比较栽培试验，对获得的试验品种进行籽粒产量测定，筛选出其中增产5%以上的高产品种；对获得的试验品种进行收获指数测定，筛选出其中收获指数达到3.0以上的高收获指数品种；将同时满足增产和收获指数要求的品种确定为高产甘蓝型油菜杂交品种；最后将其对应的F1代杂交种进行高密度种植，筛选出存株数≥80%定苗数的品种确立为耐密植高产甘蓝型油菜杂交品种。本发明的方法具有产品产量高、适用性强、通用性强等显著优点。
一种密植高产甘蓝油菜杂交品种选育方法应用

[发明专利]基于SSR-PCR的油菜杂交种种子纯度检测方法-CN201110317531.X无效
发明人：王同华;陈卫江;李莓;曲亮;范连益;惠荣奎 -专利权人：湖南省作物研究所
申请日： 2011-10-18 - 公布日： 2012-01-18 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于SSR-PCR的油菜杂交种种子纯度鉴定方法，包括以下步骤：取待测油菜杂交种样品种子进行发芽培养，将培养的幼苗进行碱裂解，同时进行超声波破碎处理，加入提取缓冲液后得到基因组DNA溶液；利用SSR引物序列对基因组DNA进行PCR扩增；PCR扩增产物在琼脂糖凝胶中进行稳压电泳分离；电泳分离后的PCR扩增产物置于凝胶成像系统中成像、读带，将样品种子的谱带特征与其父母本种子进行比对，统计出样品种子中具有父本谱带特征和母本谱带特征的种子数量，再根据品种纯度公式即可得到待测油菜杂交种样品的纯度。本发明的鉴定方法具有快速简便、高通量、检测成本低、检测效率高、检测结果稳定可靠等优点。
基于 ssr pcr 油菜杂交种种子纯度检测方法

[发明专利]甘蓝型油菜杂交种种子纯度快速鉴定方法-CN200810143770.6无效
发明人：陈卫江;王同华;曲亮;李莓;范连益 -专利权人：湖南省作物研究所
申请日： 2008-12-01 - 公布日： 2009-05-13 - 主分类号： G01N21/25 文献下载
摘要：本发明公开了一种甘蓝型油菜杂交种种子纯度快速鉴定方法，具体包括以下步骤：将种子压扁用2-氯乙醇溶液浸泡2～3h提取醇溶蛋白，然后用分离胶和浓缩胶进行电泳分离，电泳结束后进行固定、染色、脱色显带，最后通过读带计算出油菜杂交种种子的纯度。本发明的鉴定方法具有操作简单、成本低、效率高、准确性高等优点。
甘蓝油菜杂交种种子纯度快速鉴定方法

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