本发明公开了3G9‑LNM抗体偶联蛋白及其制备方法和应用,该蛋白通过断裂内含肽反式剪接将肿瘤抗原和抗体结合得到,蛋白重链氨基酸序列如SEQ ID NO:10所示,轻链氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示,轻链不参与反应。本发明提供的3G9‑LNM抗体偶联蛋白及其制备方法和应用,克服了现有抗原‑抗体连接方法需要加入化学试剂、有一定毒性、化学偶联不稳定、偶联键易断裂等问题,利用断裂内含肽GP41‑1反式剪接方法的连接是通过肽键连接,其稳定性更高,特异性结合更强,反应条件温和,效率高,工艺简单,且未加入有毒有害物质,也不会产生副产物等,安全性高,为新型肿瘤疫苗的研发提供技术支撑和新思路。