本发明属于基因工程技术领域，提供了一种源于米曲霉菌制备高F值低聚肽的特异性羧肽酶。一种羧肽酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述羧肽酶来源于米曲霉菌（Aspergillus oryzae）M30011，保藏编号为CGMCC No.12371。本发明还包括该羧肽酶的突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2‑4任一所示。上述羧肽酶可用于制备高F值低聚肽。本发明提供的羧肽酶及生产该酶的工程菌。通过对特殊位点的改造，提高了羧肽酶切除多肽底物中芳香族氨基酸的效率，能够有利于提高产品F值，降低酶法生产成本，减少后期纯化过程中的能耗，降低环境污染，实现高效制备高F值低聚肽的工业化生产应用。
本发明公开了一种以米糠为原料制备高F值低聚肽的方法：将米糠蛋白依次用内肽酶和外肽酶水解，获得酶解液，纯化、浓缩或干燥后得到高F值低聚肽；所述内肽酶为碱性蛋白酶或氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的胰凝乳蛋白酶；所述外肽酶选自风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、氨基酸序列SEQ ID NO:1或2所示的羧肽酶。本发明以米糠蛋白为原料，米糠的成本低、产量高，含蛋白量高。通过两步酶解制备得到高F值低聚肽，具有生产成本低，安全性高，条件温和等优点。本发明可以提高粮油加工副产物的利用率，使低值植物蛋白变成高值的高F值低聚肽产品。减少资源浪费和环境污染，对米糠的综合开发应用和高F值低聚肽工业化应用具有重要的意义。
