本发明属于牛病毒检测技术领域，尤其涉及一种鉴别口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重荧光RT‑LAMP检测引物组、试剂盒及其应用。一种鉴别口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重荧光RT‑LAMP检测引物组，包括2组特异性引物，其中1组为FMDV‑F3、FMDV‑B3、FMDV‑FIP(F1c‑F2)和FMDV‑BIP(B1c‑B2)，另1组为VSV‑F3、VSV‑B3、VSV‑FIP(F1c‑F2)和VSV‑BIP(B1c‑B2)，其分别具有如SEQ ID No.1至SEQ ID No.8所示的序列。本发明建立的口蹄疫和水泡性口炎二重荧光RT‑LAMP方法具有简便、快速、特异、敏感等优点，可用于FMDV和VSV的临床检测和流行病学调查；本发明所建立的FDMV和VSV二重荧光RT‑LAMP方法是一种简便，快速，低成本的诊断方法，适用于大规模的流行病学调查。
