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[发明专利]NDUFS3基因敲低和/或过表达的稳转株及其构建方法-CN201910831248.5有效
发明人：朱月春;易子寒;蒋露;熊国行;赵雷;况应敏;张巧 -专利权人：昆明医科大学
申请日： 2019-09-04 - 公布日： 2021-05-14 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开了NDUFS3基因敲低和/或过表达的稳转株及其构建方法,涉及基因工程技术领域，具体而言，该构建方法包括将目的基因插入细胞株，通过采用8～10μg/mL嘌呤霉素对转染后的细胞株进行筛选，得到NDUFS3基因敲低和/或过表达的稳转株。相对于传统的稳转细胞株构建方法，本发明实施例提供的构建方法减少并优化了实验步骤，提高了转染效率，一次性选择高滴度的病毒进行转染，之后进行高浓度的药物筛选，减少了实验时间，可将筛选时间缩短至5天，且不需要低浓度的嘌呤霉素进行维持。
ndufs3 基因表达稳转株及其构建方法

[实用新型]一种黑色素瘤穿刺活检及标本存放装置-CN201921088981.4有效
发明人：易子寒;朱月春;张巧;熊国行;赵雷;杨丽娟;易晓佳;杨晖 -专利权人：昆明医科大学
申请日： 2019-07-12 - 公布日： 2020-06-26 - 主分类号： A61B10/02 文献下载
摘要：本实用新型揭示的一种黑色素瘤穿刺活检及标本存放装置，包括套管组件、座管组件和穿刺组件，穿刺组件包括切割安装管、穿刺安装管、切割管、穿刺管和管座，切割安装管一端固定连接盘状的管座，切割安装管另一端固定插接有切割管，穿刺安装管活动套装于切割安装管内，穿刺安装管一端依次贯穿切割安装管、管座和座管体延伸至外部并固定连接片状的推板，穿刺安装管另一端固定插接有穿刺管，穿刺管活动套装于切割管内；通过设置切割管和穿刺管分别固定于切割安装管和穿刺安装管上，方便将直接接触肿瘤的切割管和穿刺管取下进行清洗或替换，有效的解决了穿刺针头不容易清洗的问题，同时也方便取出活检样本。
一种黑色素瘤穿刺活检标本存放装置

[实用新型]一种大鼠简易固定装置-CN201921058055.2有效
发明人：赵雷;况应敏;朱月春;曾云俊;熊国行 -专利权人：昆明医科大学第一附属医院
申请日： 2019-07-08 - 公布日： 2020-06-19 - 主分类号： A61D3/00 文献下载
摘要：本实用新型属于实验动物固定器械技术领域，公开了一种大鼠简易固定装置，包括内筒体、外筒体、鼠尾固定部；内筒体包括头部和围栏部，头部的一端为封闭端，头部的另一端为开口端，围栏部包括多个柱栏，柱栏沿头部的长度方向设置在头部的开口端上，外筒体包括第一端和第二端，外筒体的第一端内侧壁上设有与柱栏滑动配合的柱栏槽，柱栏插入柱栏实现内筒体和外筒体的滑动连接，第二端设置有环形防脱垫。该装置能够对不同大小的大鼠进行可靠地固定；在内筒体的柱栏之间的间隔可使大鼠四肢充分暴露，在进行关节腔注射和皮下注射时节省了人力，而且能够避免在注射时被大鼠咬伤风险，方便实验人员进行实验。
一种大鼠简易固定装置

[发明专利]一种检测烟气总粒相物对细胞炎症效应因子影响方法-CN201611056530.3有效
发明人：管莹;李雪梅;夭建华;熊国行;米其利;高茜;朱洲海 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2016-11-25 - 公布日： 2019-01-25 - 主分类号： C12N5/02 文献下载
摘要：本发明公开一种检测烟气总粒相物对细胞炎症效应因子影响方法，包括以下步骤：(1)受试物的前处理；(2)人肺成纤维细胞单细胞悬浮液的制备；(3)人肺成纤维细胞单细胞悬浮液的细胞浓度的计算；(4)人肺成纤维细胞单细胞悬浮液的细胞接种；(5)受试物的分组；(6)受试物检测剂量的设定；(7)受试物培养品的制备；(8)受试物的孵育；(9)受试物孵育品的收集；(10)标准溶液配制；(11)添加待测样；(12)添加抗体；(13)添加结合液；(14)显色；(15)测量吸光值；(16)细胞因子分泌量测定。本发明的方法能够准确有效的检测卷烟烟气总粒相物对细胞炎症效应因子分泌影响。
受试物单细胞悬浮液成纤维细胞细胞炎症效应因子总粒相物人肺种检测孵育烟气制备标准溶液配制细胞因子分泌卷烟烟气细胞接种结合液前处理检测测样抗体吸光显色分泌测量细胞分组

[发明专利]一种用于检测电子烟制品对细胞微核率影响的方法-CN201611056862.1有效
发明人：李雪梅;管莹;夭建华;熊国行;米其利;高茜;朱洲海 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2016-11-25 - 公布日： 2019-01-25 - 主分类号： C12N5/02 文献下载
摘要：本发明公开一种用于检测电子烟制品对细胞微核率影响的方法，包括如下步骤：受试物前处理、人肺成纤维细胞单细胞悬浮液的制备、人肺成纤维细胞单细胞悬浮液浓度计算、人肺成纤维细胞单细胞悬浮液的细胞接种、受试物分组、受试物检测剂量的设定、受试物培养品的制备、受试物培养品的低渗、受试物培养品滴片的制备等步骤。本发明综合考察电子烟制品的使用特点、作用方式，建立了电子烟制品样品前处理方法，且根据电子烟制品作用靶细胞选取了人肺成纤维细胞作为电子烟制品细胞毒性试验检测用细胞，并确定了样品检测剂量，形成了适合电子烟制品的体外微核试验检测方法。
一种用于检测电子制品细胞微核率影响方法

[发明专利]一种检测电子烟制品对细胞过氧化氢酶酶活力影响的方法-CN201611055893.5有效
发明人：管莹;夭建华;李雪梅;熊国行;米其利;高茜;朱洲海 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2016-11-25 - 公布日： 2019-01-25 - 主分类号： C12Q1/30 文献下载
摘要：本发明公开一种检测电子烟制品对细胞过氧化氢酶酶活力影响的方法，包括如下步骤：受试物前处理、人肺成纤维细胞单细胞悬液的制备、人肺成纤维细胞细胞浓度计算、人肺成纤维细胞细胞接种、受试物分组、受试物孵育、受试物孵育品收集、受试物孵育品的裂解离心、标准曲线的测定、受试物孵育品的测定、蛋白浓度测定和过氧化氢酶酶活力计算等步骤。本发明对样品的有效处理、检测剂量的优化设定以及靶细胞的正确选择，使得本方法能够准确有效的检测电子烟制品对细胞过氧化氢酶酶活力影响的方法。
一种检测电子制品细胞过氧化氢酶活力影响方法

[发明专利]一种用于检测电子烟制品对细胞活性氧分泌影响的方法-CN201611056540.7有效
发明人：管莹;夭建华;李雪梅;熊国行;米其利;高茜;朱洲海 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2016-11-25 - 公布日： 2019-01-25 - 主分类号： C12N5/02 文献下载
摘要：本发明公开一种用于检测电子烟制品对细胞活性氧分泌影响的方法，其包括如下步骤：(1)受试物的前处理；(2)人肺成纤维细胞单细胞悬浮液的制备；(3)人肺成纤维细胞单细胞悬浮液的细胞浓度的计算；(4)人肺成纤维细胞单细胞悬浮液的细胞接种；(5)受试物的分组；(6)受试物检测剂量的设定；(7)受试物培养品的制备；(8)受试物的孵育；(9)加入阳性对照物；(10)装载探针；(11)样品测定；(12)活性氧水平计算。本发明对样品的有效处理、检测剂量的优化设定以及靶细胞的正确选择，使得本方法能够准确有效的检测电子烟制品对细胞活性氧水平影响的方法。
一种用于检测电子制品细胞活性氧分泌影响方法

[发明专利]一种兼具烟灰缸功能的卷烟包装盒-CN201710282792.X有效
发明人：管莹;夭建华;李雪梅;朱洲海;米其利;高茜;熊国行 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2017-04-26 - 公布日： 2018-09-28 - 主分类号： B65D85/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种兼具烟灰缸功能的卷烟包装盒，包括外盒，外盒的顶端开口，外盒内设置有抽屉式的烟灰盒，烟灰盒的底端开口，烟支盒置于烟灰盒内，烟支盒和烟灰盒可以相对抽拉运动；烟支盒和烟灰盒与外盒内腔的形状尺寸相适配，并可从外盒顶端开口处拉出或推入。本发明结构简单，操作方便；与传统烟盒相比，除设有盛放烟支的烟支盒外还设有烟灰盒，能有效解决现有烟盒功能单一、无法盛放烟灰的问题且符合传统的审美和使用习惯。
一种兼具烟灰缸功能卷烟包装

[发明专利]检测电子烟气溶胶水提物对细胞活性氧分泌量影响的方法-CN201710860879.0在审
发明人：管莹;李雪梅;张霞;熊国行;高茜;陆舍铭;米其利;夭建华;朱洲海 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2017-09-21 - 公布日： 2018-03-23 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测电子烟气溶胶水提物对细胞活性氧分泌量影响的方法。包括样品前处理、单细胞悬浮液制备、细胞浓度计算、细胞接种、受试物暴露、装载探针、样品测定和活性氧水平计算等步骤。本发明综合考察了电子烟制品的暴露途径，作用方式，建立了全新的电子烟制品烟雾前处理方法，选取人肺成纤维细胞HPF作为检测用细胞，并确定了样品检测剂量。样品的有效处理、检测剂量的优化设定以及靶细胞的正确选择，使得本方法能够准确检测电子烟制品对细胞活性氧分泌量的影响，进而能够有效地评价电子烟制品对细胞的氧化性损伤。
检测电子烟气溶胶水提物细胞活性氧分泌影响方法

[实用新型]一种用于全身暴露吸入试验的动物隔离笼-CN201720399472.8有效
发明人：管莹;李雪梅;夭建华;熊国行;米其利;高茜;朱洲海 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2017-04-17 - 公布日： 2018-02-23 - 主分类号： A01K1/03 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种用于全身暴露吸入试验的动物隔离笼，包括笼体和笼门，所述的笼体内设置有多个活动挡板，将笼体分隔成多个独立的隔离仓；所述的笼体顶部设置有多个插槽，笼体底部设置有多个卡槽，所述的活动挡板从插槽插入笼体内，并通过任一卡槽固定。本实用新型结构简单、操作方便，且避免了试验过程中动物间的相互啃咬，排除动物在试验过程中非试验的其他损伤，有益于试验结果的客观性。
一种用于全身暴露吸入试验动物隔离

[发明专利]一种具有美容作用的组合物及其应用-CN201510501850.4有效
发明人：姜文圣;申开泽;熊国行;罗秉俊;钱如贵 -专利权人：云南天美天康生物科技有限公司
申请日： 2015-08-14 - 公布日： 2018-01-16 - 主分类号： A61K8/9794 文献下载
摘要：本发明公开一种具有美容作用的组合物及其应用，包括以下重量份的组分红心火龙果粉100～180份、库拉索芦荟提取物120～180份、山楂提取物35～50份、茶多酚20～50份、维生素C 30～60份、富硒酵母2～5份。本发明公开的组合物依托衰老的自由基理论和免疫学说进行开发，具有抗氧化、增强免疫力和改善皮肤水分的作用，能够充分发挥抗衰老的美容保健功能。服用本发明提供的组合物30～45天，其皮肤衰老特征得到明显改善。
一种具有美容作用组合及其应用

[发明专利]一种用于检测电子烟制品对细胞脂质过氧化影响的方法-CN201710226543.9在审
发明人：管莹;夭建华;李雪梅;熊国行;米其利;高茜;朱洲海 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2017-04-09 - 公布日： 2017-12-12 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明公开一种用于检测电子烟制品对细胞脂质过氧化影响的方法，包括如下步骤受试物前处理、人肺成纤维细胞单细胞悬液的制备、人肺成纤维细胞单细胞悬浮液细胞浓度计算、人肺成纤维细胞单细胞悬浮液的细胞接种、受试物分组、受试物检测剂量的设定、受试物培养品的制备、受试物孵育、受试物孵育品的收集、受试物孵育品的裂解离心、丙二醛含量计算等步骤。本发明对样品的有效处理、检测剂量的优化设定以及靶细胞的正确选择，使得本方法能够准确有效的检测电子烟制品对细胞脂质过氧化影响。
一种用于检测电子制品细胞过氧化影响方法

[实用新型]一种方便更换垫料的实验鼠饲养笼-CN201720324794.6有效
发明人：管莹;米其利;李雪梅;夭建华;田丽梅;李晶;刘欣;熊国行 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2017-03-30 - 公布日： 2017-12-01 - 主分类号： A01K1/035 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种方便更换垫料的实验鼠饲养笼。包括笼体、置物槽、笼盖，笼体与笼盖活动连接，放置于笼体内的置物槽分成食物放置槽和饮水瓶放置槽两个部分，食物放置槽底部设有格栏，饮水瓶放置槽内放置饮水瓶，饮水瓶口设有吸管，吸管通过孔伸入笼体，所述笼体侧壁底部设有开口，垫料置换盖能打开和闭合开口且开口大小小于鼠的大小，孔的口径小于饮水瓶的外径。本实用新型结构简单，操作方便，不用转移动物即可完成垫料的更替，避免了因动物的频繁转移造成动物逃逸或咬伤饲养人的情况发生，提高了工作效率及安全性。
一种方便更换实验饲养

[发明专利]一种用于检测电子烟制品对细胞早期凋亡影响的方法-CN201710226545.8在审
发明人：管莹;夭建华;李雪梅;熊国行;米其利;高茜;朱洲海 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2017-04-09 - 公布日： 2017-08-18 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明公开一种用于检测电子烟制品对细胞早期凋亡影响的方法，包括如下步骤受试物前处理、人肺成纤维细胞单细胞悬液的制备、人肺成纤维细胞细胞浓度计算、人肺成纤维细胞细胞接种、受试物分组、受试物孵育、受试物孵育品的收集、细胞早期凋亡影响率的测定等步骤。本发明对样品的有效处理、检测剂量的优化设定以及靶细胞的正确选择，使得本方法能够准确有效的检测电子烟制品对细胞早期凋亡的影响。作为电子烟制品细胞毒性检测的补充方法以区别制品对细胞坏死和凋亡的影响。
一种用于检测电子制品细胞早期影响方法

[发明专利]一种方便更换垫料的实验鼠饲养笼-CN201710202870.0在审
发明人：管莹;米其利;李雪梅;夭建华;田丽梅;李晶;刘欣;熊国行 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2017-03-30 - 公布日： 2017-07-25 - 主分类号： A01K1/035 文献下载
摘要：本发明公开了一种方便更换垫料的实验鼠饲养笼。包括笼体、置物槽、笼盖，笼体与笼盖活动连接，放置于笼体内的置物槽分成食物放置槽和饮水瓶放置槽两个部分，食物放置槽底部设有格栏，饮水瓶放置槽内放置饮水瓶，饮水瓶口设有吸管，吸管通过孔伸入笼体，所述笼体侧壁底部设有开口，垫料置换盖能打开和闭合开口且开口大小小于鼠的大小，孔的口径小于饮水瓶的外径。本发明结构简单，操作方便，不用转移动物即可完成垫料的更替，避免了因动物的频繁转移造成动物逃逸或咬伤饲养人的情况发生，提高了工作效率及安全性。
一种方便更换实验饲养

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