本申请涉及生物检测技术领域，尤其涉及一种检测牛焦虫病病原体的引物和探针、试剂盒。检测牛焦虫病病原体的引物和探针包括：第一上游引物，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，第二上游引物，核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，第三上游引物，核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，第四上游引物，核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，下游引物，核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，以及探针，核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。该引物和探针可以快速、准确、低成本地检测牛焦虫病病原体，为实现牛焦虫病的潜伏期诊断和基层流行病学调查提供可能。
本申请属于分子生物学技术领域，尤其涉及一种用于CPSI和AIV二重荧光定量PCR检测的引物探针组、试剂盒及方法。其中，引物探针组包括针对CPSI的引物探针组包括：SEQ ID NO.1所示的CPSI F引物、SEQ ID NO.2所示的CPSI R引物和SEQ ID NO.3所示的CPSI Pb探针；以及针对AIV的引物探针组包括：SEQ ID NO.4所示的AIV F引物、SEQ IDNO.5所示的AIV R引物和SEQ ID NO.6所示的AIV Pb探针。本申请引物探针组可用于微量的CPSI和AIV二重荧光定量PCR检测，可同时检测出鹦鹉热衣原体和禽流感病毒，特异性强，灵敏度高。
本发明公开了一种肠道病毒通用型、CA16型、EV71型三重直接荧光RT‑PCR的检测试剂盒和反应体系。本发明的检测试剂盒包括引物和探针分子，其碱基序列为SEQ ID NO：1‑9，能够同时检测肠道病毒通用型、CA16型和EV71型。使用本发明的试剂盒，可以直接将样本加入反应管内进行检测，而不需要纯化RNA这一繁琐的步骤，减少了操作步骤，可以快速、准确检测肠道病毒通用型，缩短检测时间，提高检测效率，节省成本，同时可以有效地降低交叉污染的风险。
本发明公开了一种用于口蹄疫病毒分型直接荧光RT‑PCR检测的引物和探针及试剂盒，包括：检测口蹄疫病毒通用的引物，其碱基序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示；检测口蹄疫病毒的探针，其碱基序列如SEQ ID NO:3‑5所示，探针序列的5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团。采用本发明的引物和探针或试剂盒，并结合其它常规试剂组分，能够实现在一个PCR管中连续、自动进行病毒RNA的释放、反转录和荧光定量PCR检测，不需要纯化RNA这一繁琐的步骤，减少了操作步骤，可以快速、准确检测口蹄疫病毒，缩短检测时间，提高检测效率，节省成本。
本发明公开了一种流感病毒A型、B型联合检测引物、探针、试剂盒及应用，所述引物的序列如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示；所述探针的序列如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:6所示。使用本发明的引物和探针进行流感病毒A型和B型直接扩增的RT-PCR检测，克服了常规RT-PCR需要提取RNA这一繁琐步骤的不足，减少操作步骤，可以同时检测流感病毒A型和B型，提高检测效率，节省成本，有效避免交叉污染，能进行流感病毒的高通量检测，对快速发现流感疫情，及时制定防控措施具有重要的意义。
