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[发明专利]新的甲型肝炎灭活疫苗病毒毒株及其培养方法-CN200810018656.0有效
发明人：张玉慧;曹雨露;周佳丽;胡焱灵;蒋建江;王益民;黄明 -专利权人： 江苏延申生物科技股份有限公司
申请日： 2008-03-08 - 公布日： 2009-09-09 - 主分类号： C12N7/08 文献下载
摘要：本发明提供一种制备甲型肝炎灭活疫苗的新的甲型肝炎病毒JS-4株及其培养方法。该毒株是从一个甲型肝炎急性感染患者粪便中分离，再传至Vero细胞上适应培养所得，经中和试验等方法证明为甲肝病毒，适应过程中，早代次培养周期为28天，传至10代后缩短至21天，继续培养10代，培养温度为35℃-36℃，病毒繁殖周期由28天缩短到21天，抗原滴度可达1∶640-1∶1280，感染性滴度为106.67-107.50CCID50/ml。经绒猴毒力试验证明该毒株毒力较弱，用它生产甲型肝炎灭活疫苗不仅在安全性方面更可靠，而且具有良好的免疫原性和保护效果，是生产甲型肝炎灭活疫苗的理想毒株。
肝炎疫苗病毒及其培养方法

[发明专利]生产和纯化甲型肝炎灭活疫苗的方法-CN200710022423.3无效
发明人：张玉慧;赵永强;曹雨露;许峰;金晓中 -专利权人： 江苏延申生物科技股份有限公司
申请日： 2007-05-18 - 公布日： 2008-11-19 - 主分类号： A61K39/29 文献下载
摘要：一种生产和纯化甲型肝炎灭活疫苗的方法，其工艺步骤为：从工作细胞库中复苏Vero细胞，将Vero细胞接种于2～5层2～5升的盛放培养液的转瓶中，进行高密度培养，取工作种子毒种接种于Vero细胞，经吸附后培养至病毒增殖高峰期；将经过Vero细胞培养的含HAV病毒的细胞消化后收获，通过离心后弃上清，加磷酸盐缓冲液悬浮制成甲肝病毒原液；甲肝病毒原液经过破碎后，加入氯仿，掁摇离心取上层水相，然后再加入磷酸盐缓冲液，制成粗制甲肝病毒液，经超滤浓缩后，再经疏水柱、凝胶柱两步纯化，最后过滤除菌，收集过滤液为纯化甲肝病毒液，进行灭活，然后经过佐剂吸附后，制成甲肝半成品，分装得甲型肝炎灭活疫苗。本发明能提高细胞密度、提高病毒产量、降低生产成本，并可实现批量生产。
生产纯化肝炎疫苗方法

[发明专利]应用生物反应器大规模生产流感疫苗的方法-CN200610011773.5无效
发明人：张玉慧 -专利权人： 江苏延申生物科技股份有限公司
申请日： 2006-04-24 - 公布日： 2007-10-31 - 主分类号： A61K39/145 文献下载
摘要：一种应用生物反应器大规模生产流感疫苗的方法，本发明采用将流感毒种在非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)上进行传代适应，在适当浓度的裂解剂的作用下，流感病毒对Vero细胞感染能力增强，并很快适应Vero细胞，然后将流感毒种接种到在生物反应器已增殖到10⁷个/ml以上细胞密度的Vero细胞中，调节反应器各种控制参数，使病毒在高细胞密度的生物反应器中高效繁殖，并连续灌流，收获病毒液，然后进行病毒的灭活、浓缩、纯化、裂解等步骤制成流感疫苗。本发明的应用生物反应器大规模生产流感疫苗，解决了以往采用鸡胚生产流感疫苗所存在的外源病毒污染难以控制、副反应大、成本高、生产规模不易扩大的缺点，它具有安全有效、抗原量高、质量稳定、易于扩大规模等优点。
应用生物反应器大规模生产流感疫苗方法