本发明提供了一种新型冠状病毒核酸检测试剂盒,包括两条crDNA或者两条crRNA。所述crDNA包括:靶向E gene的crDNA:其序列如SEQ ID NO.3‑5中任一所示;靶向N gene的crDNA:其序列如SEQ ID NO.6‑8中任一所示。所述crRNA包括:靶向E gene的crRNA:其序列如SEQ ID NO.9‑11中任一所示;靶向N gene的crRNA:其序列如SEQ ID NO.12‑14中任一所示。本发明设计与新型冠状病毒E gene和N gene相关的crRNA,结合CRISPR‑cpf1系统进行筛查检测,此方法具有简单、速度快、灵敏度高、特异性强的特点,实用性极强。
本发明公开了一种检测叶酸代谢相关分子标志物基因突变的crRNA、试剂盒及检测方法,其中crRNA包括:MTHFR‑667突变位点的crRNA:序列如SEQ ID NO.11‑12任一所示;MTHFR‑1298突变位点的crRNA:序列如SEQ ID NO.13‑14任一所示;MTRR‑66基因突变位点的crRNA:序列如SEQ ID NO.15‑16任一所示。通过对crRNA进行筛选并结合CRISPR‑Cpf1系统,可在短时间内检测待测样本中是否存在叶酸代谢相关分子标志物基因突变,所述试剂盒及检测方法不仅操作简单、检测速度快、成本低、可多次重复检测,同时检测灵敏度和检测特异性也显著提高。
本发明提供了一种非洲猪瘟病毒的crRNA、检测试剂盒与检测方法,所述crRNA的序列如SEQ ID NO.5‑7任一所示。所述试剂盒包括所述crRNA;还包括DNA酶抑制剂、cpf1蛋白、待检测样本的扩增体系。本发明将用于检测非洲猪瘟病毒的crRNA组成的检测试剂(CRISPR/Cpf1检测体系)与RPA等温扩增合为一个步骤,并且以胶体金试纸条的形式呈现检测结果,操作简便、时间短,无需仪器,等温反应即可。方法简单、检测速度快、灵敏度高、特异性强。
本发明提供了一种结肠癌相关分子标志物基因突变的crRNA、检测试剂盒与检测方法,所述crRNA包括:KRAS‑exon2突变位点的crRNA:其序列如SEQ ID NO.14‑16任一所示;KRAS‑exon3突变位点的crRNA:其序列如SEQ ID NO.17‑18任一所示;NRAS‑exon2基因突变位点的crRNA:其序列如SEQ ID NO.19‑20任一所示;BRAF基因突变位点的crRNA:其序列如SEQ ID NO.21‑22任一所示。本发明设计与结肠癌相关分子标志物突变靶点的4个crRNA,结合CRISPR‑cpf1系统进行突变检测,此方法具有速度快、灵敏度高、特异性强的特点。
本发明提供了一种肺癌相关分子标志物基因突变的crRNA、检测试剂盒与检测方法,所述crRNA包括:EGFR‑T790M突变位点的crRNA:如SEQ ID NO.16‑17任一所示;EGFR‑L858R突变位点的crRNA:如SEQ ID NO.18‑19任一所示;BRAF基因突变位点的crRNA:如SEQ ID NO.20‑21任一所示;ALK基因突变位点的crRNA:如SEQ ID NO.22‑23任一所示;ROS1基因突变位点的crRNA:如SEQ ID NO.24‑25任一所示。本发明设计与肺癌相关分子标志物基因突变靶点相关的5个crRNA,运用此crRNA结合CRISPR‑cpf1系统进行突变检测,此方法具有简单、速度快、灵敏度高、特异性强的特点。