本发明公开了一种人视黄醇结合蛋白的纯化工艺及其多克隆抗体的制备工艺。本发明运用DEAE-Sepharose Fast Flow(DEAE-S)离子交换柱、分子筛(Superdex 75、Sephacryls-200)及疏水柱Phenyl SepharoseTM High Performance(PHSP)等多种色谱柱分离技术,成功地从肾脏损伤患者的尿液中进行人源视黄醇结合蛋白的纯化,最大程度地保留了RBP蛋白的免疫原性。将获得的人源RBP抗原用于免疫动物,从而获得抗人视黄醇结合蛋白多克隆抗体。所得抗人视黄醇结合蛋白多克隆抗体可应用于免疫比浊试剂盒。
本发明公开了一种糖化血红蛋白的纯化工艺,它是取血红蛋白液,上CM-Sepharose Fast Flow层析柱,经流动相梯度洗脱,从而获得高纯度HbAlc抗原;所述的流动相由A液和B液组成,具体为:A液:15~25mmol/LNaAc,pH=5.6~5.8;或者是15~25mmol/L NaAc+0.01~0.05%NaN3,pH=5.6~5.8;B液:15~25mmol/L NaAc+280~320mmol/L NaCl+0.01~0.05%NaN3,pH=5.6~5.8。与现有技术相比,本发明通过采用CM-Sepharose Fast Flow柱层析以获得高纯度的HbAlc抗原。