本发明涉及酶的基因工程技术领域，为解决现有技术下生物催化法制备手性(R)‑8‑氯‑6‑羟基辛酸乙酯反应速率慢，生产效率低的问题，提供一种羰基还原酶及其突变体及其在制备手性(R)‑8‑氯‑6‑羟基辛酸乙酯中的应用，所述羰基还原酶氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，突变体的氨基酸序列为由如SEQ ID NO.1所示氨基酸序列经突变得到，突变包括下述至少一个突变位点：126位、129位、194位。该该羰基还原酶和其突变体具有良好的底物耐受性和催化活性，可提高反应效率，可应用于催化潜手性羰基化合物的不对称还原反应。
本发明涉及睾酮制备技术领域，公开了可用于不对称催化制备睾酮的短链羰基还原酶PpYSDR突变体，该突变体由短链羰基还原酶PpYSDR的氨基酸序列的第85位甲硫氨酸突变为谷氨酰胺、第88位亮氨酸突变为天冬酰胺、第136位亮氨酸突变为丙氨酸和第143位天冬氨酸突变为丙氨酸中的一种或几种后得到；短链羰基还原酶PpYSDR的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。上述突变得到的短链羰基还原酶PpYSDR的突变体具有很高的催化雄烯二酮转化成睾酮的活性，可以游离酶、固定化酶或重组游离细胞的形式催化合成睾酮，雄烯二酮的转化率高，睾酮的收率高，选择性高。
本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种短链脱氢酶的突变体，所述突变体为突变体L104A、突变体A150Y、突变体Y155A、突变体I158A、突变体I202A或者突变体T205A；所述短链脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的短链脱氢酶突变体相对野生型短链脱氢酶有更高的酶活性，可以泼尼松或者配合水解酶以醋酸泼尼松为底物制备泼尼松龙，底物的转化率高，产物的收率高，无副产物产生，而且反应可在更高的底物浓度水平下进行，适宜规模化生产。
