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[发明专利]棉花黄萎病抗病相关基因GhVdr2及其应用-CN201110066390.9有效
发明人：张保龙;杨郁文;王坤波;陈天子;范晓慧;任永哲 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2011-03-18 - 公布日： 2011-09-07 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明涉及棉花黄萎病抗病相关基因GhVdr2及其应用，属于生物技术领域。GhVdr2基因是从抗黄萎病材料常抗棉中获得的一个表面受体蛋白基因，该基因含有11个LRR保守结构域，N端和C端各有1个跨膜结构域。RT-PCR分析发现GhVdr2在根中的表达量略高于其他器官，落叶型和非落叶型强致病力菌株V991和Bp2处理4天后，GhVdr2在根，茎和叶中表达量都增加，而金属离子，盐，干旱等胁迫并不能使GhVdr2的表达量增加。GhVdr2基因过量表达株的黄萎病抗病性明显增强，在病原菌接种15天后，对于V991平均病指仅为3.6%，而对照达到54%；对于Bp2的平均病指仅为2.1%，而对照达到25%。
棉花黄萎病抗病相关基因 ghvdr2 及其应用

[发明专利]一个棉花根部高效表达的启动子及其应用-CN201110041866.3有效
发明人： 杨郁文;王坤波;张保龙;范晓慧;陈天子;何冰 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2011-02-22 - 公布日： 2011-08-17 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明涉及植物基因启动子及其应用，属于生物技术领域。本发明获得了一个海岛棉黄萎病抗性相关基因Ve-5的启动子pgbv-5，Place分析表明其含有抗病相关调控元件，水杨酸，生长素，赤霉酸，乙烯、茉莉酸甲酯等激素诱导元件。同时，该启动子序列还含有较多的光调控元件。该启动子可以使目的基因在根部高效表达，特别是根冠、生长点以及部分伸长区的表达量最高。在叶片，花器官，荚这些组织中表达量很低或基本不表达。水杨酸，赤霉素以及吲哚乙酸处理拟南芥植株后GUS活性均有显著上升，说明该启动子为一个根部以及激素诱导的启动子。
一个棉花根部高效表达启动子及其应用

[发明专利]棉花抗病相关基因GBNBS及其应用-CN200910036109.X无效
发明人：张保龙;杨郁文;高媛媛;倪万潮;姚姝;沈新莲;徐英俊 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2009-09-28 - 公布日： 2010-10-27 - 主分类号： C12N15/55 文献下载
摘要：本发明涉及棉花抗病相关基因GBNBS及其应用，属于植物基因工程领域。GBNBS基因是从抗枯黄萎病材料海岛棉中获得的一个CC-NBS-LRR基因，其编码蛋白含有861个氨基酸。分别构建了GBNBS基因全长以及去除LRR区域基因片段的原核表达载体，能够分别诱导表达出90KD和60KD的目的蛋白，功能分析发现90KD蛋白具有ATP酶活力，但是60KD蛋白却丧失了大部分酶活。洋葱表皮细胞瞬时表达的亚细胞定位结果显示，GBNBS是一个膜周蛋白，特别是在胞间连丝处大量聚集。GBNBS的过量表达造成转化株中防卫基因几丁质酶的表达量明显增加，为获得抗病基因工程植株奠定基础。
棉花抗病相关基因 gbnbs 及其应用

[发明专利]一个植物组织特异以及发育后期表达的启动子及其应用-CN200910036110.2无效
发明人：方先文;杨郁文;张保龙;高媛媛 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2009-09-28 - 公布日： 2010-09-15 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明涉及一个植物组织特异以及发育后期表达的启动子及其应用，属于生物技术领域。本发明获得了一个棉花环丙烷脂肪酸合酶的启动子序列，长度为2.6Kb。Place分析表明其含有CAAT-box、TATA-box及铜离子诱导表达元件、病原菌诱导表达元件、干旱响应元件、冷胁迫响应元件等。还存在一些根特异表达元件以及花器官特异元件。GUS染色后发现该启动子使目的基因在生长发育后期特异表达，同时表达部位只限于茎基部、根以及花药。
一个植物组织特异以及发育后期表达启动子及其应用

[发明专利]棉花子叶离体培养不定芽诱导植株再生的方法-CN200710024879.3无效
发明人：倪万潮;张保龙;许亚楠;佘建明;沈新莲;张香桂;何晓兰;杨郁文 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2007-07-06 - 公布日： 2007-12-19 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明涉及棉花子叶离体培养不定芽诱导植株再生的方法，属于植物组织培养范畴。本发明以棉花种子无菌苗的子叶为外植体材料，接种在附加6－苄基氨基嘌呤3.0mg/L、吲哚乙酸1.0mg/L、2－异戊烯腺嘌呤1.0mg/L、硝酸银5.0mg/L的不定芽诱导培养基上，不定芽长到1.5cm高度时转到幼苗生长培养基上，获得再生植株；珂字棉312品种不定芽的诱导频率高达70％左右，陆地棉泗棉3号品种不定芽的诱导频率高达60％左右。棉花子叶离体培养不定芽诱导植株再生技术操作简便，培养周期短，植株再生频率高，为规模化开展棉花体细胞培养和农杆菌介导基因转化提供新的更有效的实用技术。
棉花子叶培养不定诱导植株再生方法

[发明专利]海雀稗幼穗离体培养植株再生技术-CN200710066909.7无效
发明人：梁流芳;佘建明;杨郁文;董民强;吴瑛瑛;钟小仙;陈志一;倪万潮 -专利权人：新昌县白云草业研究所;江苏省农业科学院;杭州白云草业研究所有限公司
申请日： 2007-01-25 - 公布日： 2007-08-08 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：海雀稗幼穗离体培养植株再生技术，属于植物组织培养方法，现有的海雀稗离体培养技术存在着诱导产生的愈伤组织在继代培养过程中丧失绿苗分化能力、不宜用于体细胞突变体筛选和农杆菌介导法基因转化的缺陷，本发明以颖花分花时期的幼穗为外植体材料，在附加2，4－二氯苯氧乙酸2.0mg/L、6－苄基氨基嘌呤0.05mg/L的愈伤组织诱导培养基上获得浅黄色、干燥、颗粒状愈伤组织的数量占诱导产生的愈伤组织总数40％以上；在提高琼脂条－固化剂用量1倍的培养基上进行继代培养，愈伤组织保持颗粒状结构，经过连续3代继代培养的愈伤组织的绿苗分化率达98％。本方法适用于海雀稗微繁殖、体细胞突变体筛选和基因转化。
海雀稗幼穗离体培养植株再生技术

[发明专利]一个棉花组织特异以及病原菌诱导启动子及其应用-CN200610088243.0无效
发明人：张保龙;倪万潮;杨郁文;沈新莲;佘建明;何晓兰;张香桂;徐英俊;姚姝 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2006-07-05 - 公布日： 2007-01-24 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明涉及一个棉花组织特异以及病原菌诱导及其应用，属于生物技术领域。启动子含有CAAT－box、TATA－box及乙烯、茉莉酸甲酯、脱落酸应答元件、病原菌诱发子反应元件W boxes、GT－1、MYB、MYBST1和MYB1 LEPR等。还存在一些根特异表达元件，增强GUS基因的表达。GUS基因主要在根、蕾、茎的韧皮部、叶片的叶脉以及气孔的保卫细胞中表达，表现为器官特异性表达。石蜡切片观察表明GHNBS启动子在韧皮部伴胞细胞中表达。SA，MeJA，Ethylene，枯萎病病原菌尖孢镰刀菌萎蔫专化型和细菌丁香假单胞杆菌DC3000处理后GUS活性均有显著上升，是一个器官特异以及病原相关的启动子。
一个棉花组织特异以及病原菌诱导启动子及其应用

[发明专利]一种小麦育性恢复基因的分子标记及其获得方法-CN200510096843.7无效
发明人：马正强;杨郁文 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2004-05-08 - 公布日： 2006-05-10 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明小麦育性恢复基因Rf6基因的分子标记及其获得方法，属于作物育种与生产领域。对小麦小伞山羊草易位系N2114(♀)与苏三(♂)杂交获得的F2代群体的各单株的基因型及其育性进行遗传连锁分析，获得与T型细胞质不育育性恢复基因Rf6紧密连锁的共显性SSR标记MAG218标记和显性标记gwm88标记，它们与基因Rf6的连锁最紧密。可以用来确定Rf6的存在与否以及存在状态，并预测小麦植株的育性，进而快速筛选检测携有Rf6的植株，避免环境对品种的影响，大大提高T型细胞质不育育性恢复系选育的速度与鉴定效率。
一种小麦恢复基因分子标记及其获得方法

[发明专利]小麦育性恢复基因Rf6的分子标记及其获得方法-CN200410014828.9无效
发明人：马正强;杨郁文 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2004-05-08 - 公布日： 2005-01-26 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明小麦育性恢复基因Rf6基因的分子标记及其获得方法，属于作物育种与生产领域。对小麦小伞山羊草易位系N2114(♀)与苏三(♂)杂交获得的F2代群体的各单株的基因型及其育性进行遗传连锁分析，获得与T型细胞质不育育性恢复基因Rf6紧密连锁的共显性SSR标记MAG218标记和显性标记gwm88标记，它们与基因Rf6的连锁最紧密。可以用来确定Rf6的存在与否以及存在状态，并预测小麦植株的育性，进而快速筛选检测携有Rf6的植株，避免环境对品种的影响，大大提高T型细胞质不育育性恢复系选育的速度与鉴定效率。
小麦恢复基因 rf6 分子标记及其获得方法

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