本发明公开了一种用于鸭支原体探针法荧光定量检测的引物对及其探针,该引物对的序列如SEQ ID No:4和SEQ ID No:5所示,该探针序列如SEQ ID No:6所示。采用上述引物对及其探针对鸭支原体进行探针法荧光定量检测时,其检测的特异性和灵敏度更加高,比现有技术中普通PCR检测灵敏度高15.59%(n=539)。由此,可以有效克服现有技术中普通PCR检测假阳性率高及漏检率高的问题,使检测结果更加准确。而采用该引物对及其探针制备的鸭支原体检测制品(如试剂盒等)相较于现有技术的普通PCR检测制品,有更高的灵敏度和特异性,检测效果更好。