本发明公布一种酯酶基因及其编码蛋白、固定化酶制剂的方法和应用。该酯酶基因estE核苷酸序列为SEQ ID NO.1，其编码的蛋白质EstE氨基酸序列为SEQ ID NO.2。通过异源表达获得estE的产物酯酶EstE，随后以其为目标物，金属有机框架为载体制备固定化酯酶制剂。所述固定化酯酶制剂具有较高的固定化效率及良好的活性，固定化效率为94％，酶活性为54U/mg；与游离酶相比，提高了对反应环境和有机溶剂及去垢剂的耐受性；可循环利用，经过10次的重复使用后，固定化酶制剂仍达到原始酶活性的45％以上，展现了良好的重复使用性能。该酶制剂在医药合成、农药降解、环境治理等领域具有广泛的应用价值。
本发明公布一种热稳定型酯酶EstF及其突变体与应用。该酯酶基因的核苷酸序列为SEQ ID NO：1，其编码的氨基酸序列为SEQ ID NO：2，其表达的酯酶EstF最适pH为9.0，最适温度55℃，热稳定性良好，100℃下的半衰期为4h。利用定点突变技术，设计突变引物，以重组质粒pET‑estF为模板，构建两种酯酶突变体P144G和R203K；所述的酯酶突变体具有更优良的热稳定性，在100℃下，孵育6h后，P144G酶活仍有75％，R203K残留活性仍保持在80％以上。该热稳定型酯酶和酯酶突变体在医药工业、化工生产、生物修复等领域具有广泛的应用价值。
