本发明提供了一种用于检测人细小病毒B19的荧光PCR检测引物及其试剂盒,包括用于检测人细小病毒靶标核酸的上游引物序列,如SEQ ID NO.1所示;下游引物序列如SEQ ID NO.2所示;用于检测人细小病毒靶标核酸的探针序列,如SEQ ID NO.3所示;内标的上游引物序列,如SEQ ID NO.4所示;内标的下游引物序列,如SEQ ID NO.5所示;内标的探针序列,如SEQ ID NO.6所示。本发明设计的引物、探针灵敏度高,特异性好;试剂盒操作简单,全程只需不到2h,并且内标参与全程监控。