本发明公开一种可识别11种多氯联苯的单克隆抗体及其应用,涉及环境、食品生物技术领域;该单克隆抗体重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示,轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示,本发明通过设计PCBc半抗原,合成免疫原PCBc‑KLH,进行动物免疫,通过杂交瘤抗体技术,筛选到一株分泌该抗多氯联苯单克隆抗体的细胞株,本发明提供的抗多氯联苯单克隆抗体稳定性好、识别谱宽,并作为检测试剂应用于环境或者食品中的多种多氯联苯检测,具有可现场快速检测的优点。
本发明涉及一种拟除虫菊酯类农药代谢物的广谱特异性识别单链抗体及其应用,该单链抗体基因是以一株抗3‑苯氧基苯甲酸杂交瘤细胞株为模板,分别扩增其重链和轻链可变区基因进行构建,并在大肠杆菌中进行了可溶性表达,该单链抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示;该单链抗体对多种拟除虫菊酯农药的代谢/降解产物,即3‑苯氧基苯甲酸、3‑苯氧基苯甲醛和3‑苯氧基苯甲醇具有广谱识别能力,在拟除虫菊酯类农药代谢物广谱筛查检测中具有良好的应用前景,亦可以用于单种代谢物的快速筛查检测。
本发明公开了一种基于反向荧光增强双通道信号的克百威免疫检测方法,即利用竞争免疫层析法,将样品处理液与克百威单克隆抗体‑多巴胺包金探针混合后孵育,然后滴入样品垫,通过同时观察检测试纸条的颜色变化与荧光变化,判断样品中是否含有克百威;本申请通过观察多巴胺包金的紫红色条带与量子点的绿色荧光条带实现克百威的双信号快速检测,最低检测限3.13ng/mL;其中克百威单克隆抗体重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示,轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示;该方法通过荧光的恢复‑淬灭关系转换,将读取的信号和目标物浓度变为正相关关系,提高了检测灵敏度,具有操作简单、现场检测速度快的特点。
本发明属于基因工程抗体和食品生物技术领域,涉及基于抗独特型纳米抗体的Cry1Ab毒素模拟抗原及其应用,该Cry1Ab毒素模拟抗原氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码该氨基酸的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所述,本发明提供的Cry1Ab模拟抗原可以替代价格昂贵且具有毒性的Cry1Ab标准品,并作为竞争抗原应用于Cry1Ab的竞争免疫学检测,其具有与Cry1Ab分子相似的免疫反应特性,效果良好。
本发明提供了一种人源分子改造杀虫蛋白、编码基因及其设计方法和应用,属于基因工程和生物防治领域。本发明提供了一种人源分子改造杀虫蛋白GGCC_scFv,所述人源分子改造杀虫蛋白GGCC_scFv的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。所述杀虫蛋白GGCC_scFv与小菜蛾(Plutella xylostella)中肠BBMV的亲和力比Cry1Ab、Cry1B毒素高,且与Cry1Ab、Cry1Ac和Cry1B毒素竞争结合小菜蛾中肠BBMV,为Cry1Ab、Cry1Ac和Cry1B毒素的模拟物;经小菜蛾室内杀虫生物活性测定,3d致死率可达50%,7d致死率可达95%,可有效的替代Cry1A类毒素用于生物防治虫害。
本发明提供了一种人源分子改造杀虫蛋白及其制备方法与应用,属于基因工程和生物防治领域。本发明提供了一种人源分子改造杀虫蛋白,所述杀虫蛋白CCL‑CCL_scFv的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。所述杀虫蛋白CCL‑CCl_scFv与小菜蛾(Plutella xylostella)中肠BBMV的亲和力显著高于Cry1Ab毒素,且与Cry1Ab和Cry1Ac毒素竞争结合小菜蛾中肠BBMV,为Cry1Ab和Cry1Ac毒素的模拟物;经小菜蛾室内杀虫生物活性测定,3d致死率可达55.35%,可有效的替代Cry1Ac毒素用于生物防治虫害。