本发明属于分子生物学检测技术领域，公开了基于高通量测序检测性传播病原体的多重PCR引物组、试剂盒及其方法。所述多重PCR引物组包括编号为F001‑F014的上游引物和编号为R001‑R014的下游引物；每条所述引物从5’端到3’端依次包括桥接序列和靶向不同性传播病原体的特异序列；所述编号为F001‑F014的上游引物中靶向不同性传播病原体的特异序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.14所示；所述编号为R001‑R014的下游引物中靶向不同性传播病原体的特异序列如SEQ ID NO.15～SEQ ID NO.28所示。采用所述多重PCR引物组，能够同时检测多种性传播病原体，灵敏度高，准确性好。
本发明公开了BRAF V600E基因突变检测引物、方法及试剂盒，该试剂盒含有SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所述的引物、还含有检测探针。本发明采用更优的引物和探针，对样本gDNA仅需10ng，灵敏度高达0.1％，特异性高，根据突变扩增曲线直接判断有无突变，无需计算ΔCt，结果判读简单直接，具有很好的临床应用前景。
本发明公开了ROS1基因融合检测引物、方法及试剂盒，该试剂盒含有SEQ ID NO:1～24所示的引物组和探针。本发明可检测多达13种ROS1基因融合类型。引物和探针经过优化和筛选，灵敏度可达100copies/μl，且特异性高。内标用于体系逆转录和扩增监控，保证检测正常进行。另外，试剂盒还包含阴性和阳性对照。多重质控避免检测结果出现假阳性和假阴性。
本发明公开了ALK基因融合检测引物、方法及试剂盒，该试剂盒含有SEQ ID NO:1～22所示的引物组和探针。本发明可检测多达15种ALK基因融合类型。引物和探针经过优化和筛选，灵敏度可达100copies/μl，且特异性高。内标用于体系逆转录和扩增监控，保证检测正常进行。另外，试剂盒还包含阴性和阳性对照。多重质控避免检测结果出现假阳性和假阴性。
