本发明公开了一种基于核酸探针首尾互补策略的汞离子的检测方法及检测试剂盒。设计富含T碱基的核酸为分子识别元件,通过T‑Hg2+‑T配对,与捕获探针结合,从而固定在磁珠上,磁珠分离后加入首尾互补的两条核酸探针,通过不断杂交互补,从而形成很长的双链DNA,磁珠分离后加入荧光嵌入剂Sybr Green I,它与双链DNA结合后具有很强的荧光特性,荧光强度与汞离子浓度具有很好的相关性,从而达到检测汞离子的目的。本发明的检测方法及检测试剂盒具有较高的灵敏度,对Hg2+的检测限为2 pM,具有很好的特异性,常见的其他干扰离子对检测不产生影响。信号放大过程源于DNA探针的首尾不断互补,无需使用蛋白酶,操作简单,成本低廉。