本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种噬菌体辅助的连续定向进化系统及进化方法。该连续定向进化系统包括AP1质粒、AP2质粒、诱变质粒MP和噬菌体，AP1质粒、AP2质粒、诱变质粒MP的核酸序列分别如SEQ IDNO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示；AP1质粒携带gVI基因；噬菌体为目的基因替换gVI基因的噬菌体。定向进化方法为将AP1质粒、AP2质粒和诱变质粒MP共转化宿主菌，得到进化用工程菌；将噬菌体和进化用工程菌在含有纤维寡糖的培养基中经过多轮进化培养，在多轮进化培养过程中递减纤维寡糖在培养基中的浓度，以提高筛选压力，实现定向进化。本发明利用噬菌体gVI基因来构建进化体系，PVI不会赋予宿主噬菌体抗性，具有更高的进化效率和灵敏度。
本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种噬菌体与宿主共生的进化淀粉酶的方法及应用。所述方法以野生型SP‑amyC作为噬菌体，将AV1质粒、诱变质粒AEMP共转化携带F因子的大肠杆菌得到宿主菌，在以淀粉为唯一碳源的M9培养基中生长；AV1质粒辅助表达gVI蛋白，核酸序列如SEQ ID No.2所示；诱变质粒AEMP核酸序列如SEQ ID No.3所示；野生型SP‑amyC核酸序列如SEQ ID No.4所示。当噬菌体SP‑amyC侵染大肠杆菌后，噬菌体上的淀粉酶基因表达淀粉酶，淀粉酶水解软琼脂上的唯一碳源淀粉产生小分子麦芽寡糖为大肠杆菌提供生长所需能量，新产生的子代大肠杆菌又继续被子代噬菌体继续侵染，以此循环共生。相对传统进化方法，本发明更加高效便捷，不用建库及大量的人工筛选，成本低廉，人为干预极少。
本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种碱性纤维素酶及其制备方法和应用。本发明的碱性纤维素酶的基因来源于真正的碱性纤维质环境碱性腌竹池，碱性纤维素酶具体制备方法为：通过分子生物学手段获取样品的宏基因组；再高通量测序获得碱性纤维素酶的基因序列；然后将碱性纤维素酶基因扩增并整合至表达载体中，该载体转化宿主细胞；最后再培养已转化的细胞得到的发酵液中提取即得。本发明的碱性纤维素酶核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，与现有纤维素酶相似性不超过49％，在中碱性PH条件下具有较高酶活，应用于纺织抛光亦有很好效果，在纺织、洗涤、造纸等行业应用效果也很明显。
