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[发明专利]获得高产稳定表达重组抗体的骨髓瘤细胞株的方法及应用-CN201410395389.4有效
发明人：路明;喻志爱;何伟;蔡杨柳;米盖尔;林峰;美林;胡里奥;罗兰多 -专利权人：百泰生物药业有限公司;分子免疫中心
申请日： 2014-08-13 - 公布日： 2014-11-19 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种获得适用于灌流发酵生产工艺的高产稳定表达细胞株的方法。本发明的方法由五个阶段组成：高产稳定表达细胞株的获得、工业规模细胞株生产力的评价、纯化的单克隆抗体的特性分析、不同工业规模的产品特性评价、不同发酵时期的产品特性评价。这种方法的细胞株是从重组NS0骨髓瘤细胞系中获得的，该重组NS0骨髓瘤细胞系用于生产治疗癌症的抗EGFR单克隆抗体。这种方法获得的细胞株在不同的发酵规模、不同发酵运行时间的条件下保持了本身的生长特性、高表达特性和表达产物特征的一致性，适用于不同的工业规模下商业化生产治疗性抗体。本发明的方法克服了哺乳动物细胞系在灌流发酵工艺中产量降低的问题。
获得高产稳定表达重组抗体骨髓瘤细胞株方法应用

[发明专利]一种单克隆抗体的生物学活性测定方法-CN201410064974.6有效
发明人：何伟;刘永清;喻志爱;白先宏 -专利权人：百泰生物药业有限公司
申请日： 2014-02-25 - 公布日： 2014-05-14 - 主分类号： G01N21/31 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组抗人表皮生长因子受体单克隆抗体的生物学活性测定方法。将人肺癌淋巴结转移细胞H292细胞与不同浓度的抗EGFR单抗孵育，加入细胞计数染色试剂CCK-8，用酶标读数仪测定活细胞染色的吸光值，试验数据采用计算机程序处理，计算抗EGFR样品相对于抗EGFR标准品的生物学活性。本发明所采用的检测细胞H292细胞株对于不同亲和力的抗体均适用，细胞培养时间短，需要的细胞数量较少；而且本发明改进了MTT比色法的染色液，改用CCK-8染色液，产物的溶解度较好，不需要进一步的溶解处理，加入染色液后可以在不同的时间检测结果，显色结果稳定，质量更可控。该方法测定的生物学活性与临床疗效相关，符合FDA相关的技术要求。
一种单克隆抗体生物学活性测定方法

[发明专利]用于白血病和自身免疫疾病的抗体融合蛋白及其制备方法-CN201110461294.4有效
发明人：白先宏;喻志爱;何伟;林峰;何丽华;李先钟;刘方杰;扈艳红;马金伟;韩海蛟;周俊杰;王康 -专利权人：百泰生物药业有限公司
申请日： 2011-12-30 - 公布日： 2012-07-11 - 主分类号： C12N9/22 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用基因工程方法研制的一种用于白血病和自身免疫性疾病的抗体融合蛋白T1h-ONC，编码该融合蛋白的多核苷酸以及制备和纯化该融合蛋白的方法。该融合蛋白是由抗CD6的人源化单克隆抗体与豹蛙酶(ranpirnase)融合而成，在哺乳动物细胞中高效表达，且纯化工艺简短，有利于大规模制备。本发明的T1h-ONC抗体融合蛋白依然保留与CD6分子的结合特性，与CD6结合后，以免疫复合物的形式进入胞内，同时将豹蛙酶带入细胞内，降解tRNA，抑制蛋白质合成进而引起细胞凋亡。用于自身免疫性疾病及CD6阳性的白血病患者。
用于白血病自身免疫疾病抗体融合蛋白及其制备方法

[发明专利]重组人表皮生长因子生物学活性测定方法及其应用-CN201110090607.X有效
发明人：何伟;李先钟;喻志爱;林峰;白先宏 -专利权人：百泰生物药业有限公司
申请日： 2011-04-12 - 公布日： 2011-11-30 - 主分类号： G01N33/577 文献下载
摘要：本发明公开了重组人表皮生长因子(rhEGF)的生物学活性测定方法及其应用。该方法采用竞争性抑制的流式细胞法，通过抗体阻断EGF和其受体的结合来间接测定EGF与EGFR结合的生物学活性，采用计算机程序(四参数回归)处理试验数据，分别获得EGF标准品和样品的半数有效抑制浓度(EC50)，从而获得EGF样品的相对生物学活性，根据EGF标准品的生物学活性(IU/mL)，可计算出EGF样品的生物学活性。本发明除预先培养细胞外，从样品加入开始，试验周期仅为1天，试验过程中无需无菌环境，与《中国药典》中的重组人表皮生长因子生物学活性测定方法相比，实施更方便，质量更可控。
重组表皮生长因子生物学活性测定方法及其应用

[发明专利]一种新型高糖基化促红细胞生成素免疫融合蛋白-CN201010189811.2有效
发明人：程虹;杨思仪;马金伟;李桂珠;刘芳杰;扈艳红;胡品良;李先钟;喻志爱;林峰;何丽华;白先宏 -专利权人：北京精益泰翔技术发展有限公司;百泰生物药业有限公司
申请日： 2010-06-02 - 公布日： 2010-10-27 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用基因工程方法研制的新型高糖基化促红细胞生成素免疫融合蛋白，是由新红细胞生成刺激蛋白(NESP，New ErythropoietinStimulating Protein)与人IgG2-Fc融合而成的二聚体蛋白质NESP-Fc，编码该免疫融合蛋白的多核苷酸以及制备和纯化该免疫融合蛋白的方法。该免疫融合蛋白可在哺乳动物细胞中高效表达，且纯化工艺简单，有利于进一步的大规模制备。本发明的NESP-Fc免疫融合蛋白具有与天然EPO相似的生物学活性，但具有更长的血清半衰期，可用于治疗EPO水平低下引起的贫血症。
一种新型高糖基化促红细胞生成免疫融合蛋白

[发明专利]一种免疫融合蛋白及其编码基因与应用-CN200910091824.3有效
发明人：胡品良;马金伟;程红;褚学者;李先钟;扈艳红;赵天贵;喻志爱;林峰;何丽华;白先宏 -专利权人：北京精益泰翔技术发展有限公司;百泰生物药业有限公司
申请日： 2009-08-26 - 公布日： 2010-01-27 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种蛋白。本发明提供的蛋白是如下1)或2)的蛋白质：1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)将序列表中序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且能与IgE分子结合的由1)衍生的蛋白质。该蛋白与IgE较高的亲和力；FcεR Iα和IgG2均来自人源性蛋白，无抗原性，无需进行人源化改造；半衰期较长，分子量达170kDa，较sFcεR Iα大。具有潜在的治疗哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎及食物过敏等过敏性疾病的价值。
一种免疫融合蛋白及其编码基因应用

[发明专利]一种偶联物及其制备方法与应用-CN200910077058.5有效
发明人：白先宏;冷木;李先钟;喻志爱;胡品良;何伟;林峰;何丽华;王艳萍;艾军文 -专利权人：百泰生物药业有限公司
申请日： 2009-01-19 - 公布日： 2009-07-08 - 主分类号： C07K17/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种偶联物。该偶联物是将重组人表皮生长因子和重组人表皮生长因子突变体这四种蛋白中的至少一种与载体蛋白偶联得到的；所述重组人表皮生长因子的氨基酸序列如序列表中序列2所示；所述重组人表皮生长因子突变体为下述任一种蛋白：1)序列表中序列2的第53位精氨酸缺失得到的蛋白；2)序列表中序列2的第53位精氨酸和第52位亮氨酸缺失得到的蛋白；3)序列表中序列2的第1位天冬酰胺前添加甲硫氨酸得到的蛋白。将上述偶联物与佐剂混合后作为疫苗用于上皮源性肿瘤的主动治疗。结果表明，该疫苗能诱导小鼠体内高水平的抗体，最高抗体滴度达到1∶20000，且小鼠的存活期延长比率达到69.4％。
一种偶联物及其制备方法应用

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