本发明涉及生物医学领域,具体涉及一种针对口蹄疫病毒样颗粒的转座‑诱导表达系统,所述系统包括编码转座酶、反向反式激活因子、诱导剂、口蹄疫病毒样颗粒的核酸,所述转座酶可以是编码PiggyBac(PB)的转座酶及其变体,所述反向反式激活因子为可以是反向反式激活因子本身及其变体,所述诱导剂为四环素及其衍生物,所述口蹄疫病毒样颗粒的核酸为优化后的序列P12A3Copti,如SEQ ID NO:3所示。本发明经过构建PB转座‑四环素诱导表达系统,并将优化后的P12A3Copti在该系统表达,提高了P12A和3C基因稳定整合至细胞基因组的成功率,同时FMDV衣壳蛋白的表达量增加了15‑30倍。
本发明涉及一种猪圆环病毒3型病毒样颗粒及其构建方法和应用,属于病毒样颗粒制备技术领域。本发明提供了一种重组质粒,所述重组质粒以pSMA质粒作为基础载体,插入优化好的Cap全长基因,所述优化好的Cap全长基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明克服了现有真核表达系统及传统原核表达系统的不足,使利用原核表达系统可溶性表达猪圆环病毒3型完整Cap蛋白并成功实现病毒样颗粒的制备方法成为可能,且得到的病毒样颗粒免疫原性高,成本低。
本发明公开了一种耐热型口蹄疫重组病毒株及其在制备口蹄疫灭活疫苗中的应用。本发明所述的一种耐热型口蹄疫重组病毒株,命名为rM10,其是由SEQ ID NO.1所示的感染性cDNA通过病毒拯救获得的。实验证明,该重组病毒株的衣壳完全裂解的温度比野生毒株病毒的高,表明该拯救获得的口蹄疫重组病毒株rM10比野生毒株更耐热。本发明的提出为进一步推进热稳定性疫苗的研究和应用,为重大疫病防控及彻底净化提供了技术支持。同时本发明的提出为制备稳定性口蹄疫疫苗奠定了基础。