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[发明专利]一种利用生物菌剂降解农业废弃物生产生物有机肥的方法-CN202010387541.X有效
发明人：薛闯;吴又多;李苗苗 -专利权人：大连理工大学;大连金微德生物科技有限公司
申请日： 2020-05-09 - 公布日： 2021-08-24 - 主分类号： C05G3/60 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用生物菌剂降解农业废弃物生产生物有机肥的方法。通过混合鲜牛粪、木质纤维素废弃物、干酒糟以及L‑丙氨酸发酵废液，调节碳氮比至25‑30、含水率55‑65％，0.1％‑0.5％添加生物菌剂后，腐熟发酵6～18天即得生物有机肥。本发明利用干酒糟及其酶解液提供功能微生物发酵过程中所需的营养物质及促生因子，提高生物菌剂中有效活菌数，降低腐熟发酵环境营养差异；利用L‑丙氨酸发酵废液中菌体蛋白和L‑丙氨酸成分，加快孢子萌发。二者有效补充了有效补充了各类氨基酸、维生素以及钙磷矿物质成分，提升了生物有机肥营养品质与功能效价，利于农作物增产增收与提高品质。
一种利用生物降解农业废弃物生产有机肥方法

[发明专利]一种用于微生物的多基因组合编辑和筛选方法-CN202110380168.X在审
发明人：薛闯;朱超;程驰;杜广庆;吴又多;康巍 -专利权人：大连理工大学
申请日： 2021-04-09 - 公布日： 2021-07-16 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种用于微生物的多基因组合编辑和筛选方法。本发明提出一次性转化多种重组载体，每种重组载体载有一个或一个以上靶向位点，经一轮操作可以同时编辑多个目标基因以及多个靶向位点，按照随机组合原理能够快速构建含有单基因、两基因不同组合、三基因不同组合、以及多基因不同组合的菌株，获得多基因组合编辑的菌株文库。相比于常规方法一轮又一轮的次序编辑多个基因，所述方法操作简单，效率高，省时省力，应用前景广泛，比如基于组合文库促进筛选形状优良微生物，利于研究同源或同一家族基因的功能，便于改造微生物获得新的遗传功能和特性。
一种用于微生物多基因组合编辑筛选方法

[发明专利]一种复合芽孢杆菌菌剂的高密度混合发酵制备方法-CN202010388501.7有效
发明人：薛闯;吴又多;李苗苗 -专利权人：大连理工大学;大连金微德生物科技有限公司
申请日： 2020-05-09 - 公布日： 2021-07-06 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种复合芽孢杆菌菌剂的高密度混合发酵制备方法。本发明利用干酒糟丰富的营养组分，采用碱性蛋白酶酶解干酒糟产生的酶解液作为发酵培养基溶剂，通过控制发酵pH，流加补料以及维持溶氧量，实现了生防益生菌多粘类芽孢杆菌与坚强芽孢杆菌高密度混合发酵，发酵液中多粘类芽孢杆菌有效活菌数可达到1.2‑1.5×1010CFU/mL，坚强芽孢杆菌有效活菌数可达到8.0‑9.0×109CFU/mL，缩短了发酵时间，提高了生产效率。利用干酒糟酶解渣制备的复合芽孢杆菌菌剂中有效活菌数或活孢子数可达到3.0‑6.6×1011CFU/g，实现了干酒糟原料全利用，降低了菌剂生产成本。
一种复合芽孢杆菌高密度混合发酵制备方法

[发明专利]一种强化二氧化碳利用发酵分离耦合集成提高生物天然气发酵产甲烷的方法-CN202110295322.3在审
发明人：薛闯;吴又多 -专利权人：大连理工大学
申请日： 2021-03-19 - 公布日： 2021-06-08 - 主分类号： C12M1/12 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种强化二氧化碳利用发酵分离耦合集成提高生物天然气发酵产甲烷的方法。本发明利用农作物秸秆等固体废弃物进行生物天然气发酵，通过添加能利用二氧化碳的厌氧菌株发酵菌液，实现二氧化碳在生物天然气发酵中的固定利用与生物转化，利于甲烷合成并提高甲烷产量和比例；通过耦合发酵反应器与气体分离膜系统，在分离提纯甲烷的同时，使二氧化碳循环回流至发酵体系，进一步提高二氧化碳原位固定效率；通过里氏木霉发酵菌酶液预处理秸秆物料，使木质纤维素快速降解为发酵单糖，促进二氧化碳固定菌株及生物天然气发酵菌株增殖，进一步提高二氧化碳原位固定效率及生物天然气发酵产甲烷性能。
一种强化二氧化碳利用发酵分离耦合集成提高生物天然气甲烷方法

[发明专利]manY/levF基因片段在生产丁醇中的应用-CN201711338709.2有效
发明人： 吴又多;李颖;陈丽杰 -专利权人：大连理工大学
申请日： 2017-12-14 - 公布日： 2021-05-11 - 主分类号： C12N15/54 文献下载
摘要：本发明公开了manY/levF基因片段在生产丁醇中的应用。具体为高产丁醇的过表达重组梭菌及其构建方法与应用。所述manY/levF基因的序列为SEQ ID NO.1。所述过表达重组梭菌的构建方法，包括以下步骤：(1)manY/levF基因过表达重组质粒构建；(2)过表达重组质粒的扩增(3)过表达重组质粒的甲基化；(4)manY/levF基因过表达重组菌株构建；(5)过表达重组菌株丁醇发酵性能检测。本发明还包括过表达重组梭菌在生产丁醇中的发酵应用。本发明将manY/levF基因在C.acetobutylicum ATCC 824中过表达能显著提高在ABE发酵中葡萄糖、果糖以及菊芋水解液的利用率及丁醇的产量。
many levf 基因片段生产丁醇中的应用

[发明专利]ptna基因片段在生产丁醇中的应用-CN201711229869.3有效
发明人：陈丽杰;李颖;吴又多 -专利权人：大连理工大学
申请日： 2017-11-29 - 公布日： 2020-09-29 - 主分类号： C12N15/54 文献下载
摘要：本发明公开了ptna基因片段在生产丁醇中的应用。具体为高产丁醇的过表达重组梭菌及其构建方法与应用。所述ptna基因的序列为SEQ ID NO.1。所述过表达重组梭菌的构建方法，包括以下步骤：(1)ptna基因过表达重组质粒构建；(2)过表达重组质粒的扩增(3)过表达重组质粒的甲基化；(4)ptna基因过表达重组菌株构建；(4)过表达重组菌株丁醇发酵性能检测。本发明还包括过表达重组梭菌在生产丁醇中的发酵应用。本发明将ptna基因在C.acetobutylicum ATCC 824中过表达能显著提高在ABE发酵中葡萄糖、果糖以及菊芋水解液的利用率及丁醇的产量。
ptna 基因片段生产丁醇中的应用

[发明专利]一种添加锌离子调控厌氧发酵生产丁醇的方法-CN201310128024.0无效
发明人：陈丽杰;吴又多;薛闯;白凤武 -专利权人：大连理工大学
申请日： 2013-04-12 - 公布日： 2013-07-24 - 主分类号： C12P7/16 文献下载
摘要：本发明公开了一种添加锌离子调控厌氧发酵生产丁醇的方法，属于生物化工技术领域。本发明根据丙酮丁醇梭菌厌氧发酵生产丁醇的特性，包括菌种活化、种子培养、厌氧发酵三个环节。采用此方法能够促进菌体生长及碳源利用，极大缩短了发酵周期、提高了丁醇产量及产率、极大提高了厌氧发酵生产丁醇的效率。该方法简单，易于操作，极其适合厌氧发酵生产丁醇的工艺调控，对于厌氧发酵丁醇工艺的开发及生物基丁醇的制备研究，具有重要的理论意义和应用价值。
一种添加离子调控发酵生产丁醇方法