本发明涉及一种STR基因座复合扩增方法及其试剂盒,用于扩增22个STR基因座和1个性别基因座;所述22个STR基因座包括vWA、D21S11、D18S51、D5S818、D7S820、D13S317、D16S539、FGA、D2S1338、D19S433、D6S1043、D12S391、D8S1179、D3S1358、D1S1656、CSF1PO、Penta D、Penta E、TH01、TPOX、D10S1248、DYS391;所述性别基因座为Amelogenin;该扩增方法及其试剂盒中采用的扩增引物包含SEQ ID NO1‑46所示序列。本发明所述的复合扩增方法及其试剂盒可以一次性同时扩增得到22个具有良好多态性和高个体识别力的STR基因座和1个性别基因座信息,此类基因座组合的复合扩增系统平衡性好,灵敏度高,特异性高,分型结果准确,完全能满足司法鉴定的需要。